O papel do exercício físico nas vias moleculares de captação de glicose em camundongos nocautes para GLUT-4

Resumo

Sabe-se que a hiperglicemia crônica através dos anos está associada a diversas alterações sistêmicas do organismo e o comprometimento desta regulação pode levar ao aparecimento de um grande espectro de distúrbios metabólicos que agrupados são denominados de risco cardiometabólico. Desta forma, é de suma importância desvendar os mecanismos pelos quais a homeostase glicêmica é regulada e quais as moléculas chaves neste controle. Nesse contexto, um procedimento que gera respostas substancialmente significativas na regulação da captação de glicose é o exercício físico. O desequilíbrio energético mediante o esforço físico desencadeia a ativação de diversos mecanismos que aumentam o transporte de glicose da corrente sanguínea para o meio intracelular através dos transportadores de glicose. Contudo, estas regulações ainda não foram totalmente elucidadas e descritas na literatura. Para isso, o principal objetivo deste estudo é comparar o impacto de dois diferentes protocolos de exercícios físicos nas vias de captação de glicose tanto dependente quanto independente de insulina em camundongos nocaute para o transportador de glicose do tipo 4 (GLUT4). Serão utilizados camundongos controle (GLUT+/+) e manipulados geneticamente GLUT4+/- com 120 dias de idade. Estes animais serão distribuídos em quatro grupos distintos (GLUT4+/+ Sedentário, GLUT4+/- Sedentário, GLUT4+/- Aeróbio, GLUT4+/- resistido). Ao final do experimento serão analisadas as adaptações decorrentes do exercício físico, sendo elas: tolerância à glicose; sensibilidade à insulina; parâmetros bioquímicos (glicose, colesterol, triglicerídeos); proteínas envolvidas na síntese de GLUT4 (MEF e GEF), via de captação de glicose modulada pela contração muscular (AMPK, pAMPK, CaMKII, pCaMKII AS160) e pela ação da insulina no musculo (IR/pIR; IRS-1/pIRS-1; PI3K/pPI3K, IRS-1/PI3K; Akt/pAkt, AS160. GLUT4); e presença de GLUT4 na membrana plasmática. No tecido adiposo serão analisadas as proteínas IR/IRS-1, Akt, AS160, PPAR-³, PRDM16 e Glut-4. Para as avaliações moleculares serão utilizadas as técnicas de Western Blot, PCR em tempo real, análise de atividade transcricional, e imunofluorescência. Ao final do experimento, espera-se elucidar quais as principais alterações nas principais vias de síntese e translocação do GLUT4 nos diferentes grupos experimentais, fornecendo assim, novas possibilidades terapêuticas e de tratamento para as desordens envolvendo o risco cardiometabólico. (AU)