Maturação in vitro de complexos cumulus-oócito de vacas holandesas com proteína sérica a associada à prenhez (Pappa): efeitos na produção e qualidade embrionária

Resumo

Fatores de crescimento são amplamente estudados na composição do meio de maturação, entre eles, o fator de crescimento semelhante à insulina (IGF), já predito como positivo na maturação ovocitária e desenvolvimento embrionário in vivo e in vitro. A bioatividade do IGF é regulada por dois mecanismos: as IGFBPs (proteínas ligantes de IGF) e a PAPPA (proteína sérica A associada à prenhez), sendo a segunda capaz de clivar as ligações do IGF às IGFBPs, aumentando a biodisponibilidade de IGF livre. Estudos recentes têm demonstrando a expressão diferencial dos membros deste sistema em ovócitos imaturos ou embriões produzidos in vitro comparando fêmeas da raça Nelore (Bos taurus indicus) e raça Holandesa (Bos taurus taurus). Neste sentido, merece destaque a maior expressão de PAPPA encontrada em ovócitos imaturos de vacas Nelore, o que poderia implicar em melhor habilidade na biodisponibilidade de IGF-1 por ovócitos oriundos dessas fêmeas e impactar positivamente na produção embrionária in vitro. Muitos estudos já investigaram os efeitos da adição de IGF-1 exógeno ao meio de maturação, no entanto, dados recentes obtidos por nosso grupo demonstram o efeito positivo da adição de PAPPA durante a MIV de ovócitos de abatedouro (na sua maioria de fêmeas zebuínas) sobre a progressão meiótica e incremento na expressão de genes referenciais de qualidade em embriões produzidos in vitro. Se tal modulação já apresenta efeitos positivos em ovários de abatedouros, hipotetizamos, que esse efeito seja mais evidente em ovócitos de vacas da raça Holandesa, melhorando a taxa e qualidade de embriões. Assim, o objetivo do presente trabalho é investigar os efeitos da adição da PAPPA durante a MIV de ovócitos de vacas Holandesas sobre a produção e qualidade embrionária. Para isso, complexos cumulus-ovócito (CCOs) bovinos provenientes de ovum pick up (OPU) de ovários de vacas Holandesas serão maturados ou não com PAPPA (0 e 100 ng/ml; dose mais efetiva em experimentos prévios), e cultivados até o estágio de blastocisto. No D7 (7p dia de cultivo embrionário in vitro), a taxa de produção será verificada e os blastocistos obtidos submetidos à quantificação relativa de genes de competência embrionária e contagem diferencial das células da massa celular interna (MCI) e trofoectoderma (TE): MCI/TE ratio. Espera-se que a adição de PAPPA durante a MIV, module a biodisponibilidade de IGF e consequentemente os efeitos positivos desse sistema reflitam em maior qualidade do ovócito, aumento da eficiência da produção e qualidade embrionária em fêmeas da raça Holandesa. (AU)