Análise da junção neuromuscular e proteínas associadas com foco na recuperação morfo funcional: uso comparativo de selante de fibrina e sutura.

Resumo

Os nervos periféricos são comumente acometidos por lesões que acarretam interrupção do impulso nervoso. A recuperação funcional geralmente é tardia, sendo considerada um desafio para clínica médica. Assim sugerimos que esse tipo de resposta esteja associado a falhas na reinervação da junção neuromuscular(JNM), acompanhada de alterações nas suas proteínas estruturais, ocasionando um defeito na capacidade de ativação elétrica muscular. Este projeto tem como objetivo comparar o uso de selante de fibrina e sutura após lesão do nervo isquiático com foco nas junções neuromusculares e proteínas associadas. Serão utilizados 50 ratos Wistar machos adultos, divididos em 5 grupos experimentais: Controle-Sham (CS) e Controle-Desnervado (CD); Lesão Sutura (LS); Lesão Selante de Fibrina (LSF) e Lesão Sutura + Selante de Fibrina (LSS). Após análise de marcha dos animais (pré operatório) o grupo CS será submetido a uma incisão superficial da pele. Nos grupos CD, LS, LSF e LSS será realizada neurotmese do nervo isquiático direito com fixação dos cotos proximais e distais na musculatura. Após 7 dias será realizado reconexão dos cotos com selante de fibrina (CEVAP) no grupo LSF e com sutura no grupo LS e ambos procedimentos no grupo LSS. Aos 15, 30 e 60 dias os animais realizarão novo teste de marcha e ao final do experimento (60dias)serão eutanasiados. Os nervos isquiáticos direito serão coletados e analisadas a sua morfologia e parâmetros morfométricos. Os músculos sóleos direitos serão processados para análises: morfológica, ultraestrutural e morfométrica das JNMs; análise morfométrica dos nAChRs e morfológica dos terminais nervosos por meio de microscopia confocal; análise morfológica e morfométrica das fibras musculares (HE) e da freqüência das fibras tipo I e tipo II; quantificação protéica dos nAChRs, Agrina, Musk, MMP3 e células de Schwann. (AU)