Engenharia Tecidual e Biotecnologia aplicadas no desenvolvimento de scaffolds macroporosos contendo cálcio e com nano-topografia de superfície para modulação da regeneração do complexo dentino-pulpar

Resumo

O desenvolvimento de scaffolds porosos e arquitetura de superfície modificada é de grande interesse na área da Odontologia, visto que este substrato apresenta potencial para induzir a regeneração do complexo dentino-pulpar, estimulando a migração de células tronco residentes da polpa (DPSCs) para a área da ferida pulpar. Assim, este projeto de pesquisa tem como objetivo empregar diferentes técnicas de Engenharia Tecidual e Biotecnologia, para obter scaffolds com uma rede de poros interconectados, contendo cálcio e com nano-topografia de superfície, para estimular a expressão do fenótipo odontoblástico pelas DPSCs e induzir o processo de dentinogênese. Para isto, serão formulados scaffolds com diferentes composições e topografia de superfície lisa ou nano-globular, os quais serão caracterizados quanto as suas propriedades físico-químicas, o que envolve morfologia, grau de degradabilidade, módulo de elasticidade e resistência compressiva. Em seguida, as DPSCs serão obtidas por desagregação enzimática do tecido pulpar de terceiros molares hígidos, sendo caracterizadas quanto aos marcadores de células-tronco por meio de imunofluorescência. Então, essas células serão semeadas sobre a superfície dos scaffolds para avaliação da viabilidade, proliferação e migração celular, adesão e espalhamento, expressão gênica, bem como deposição de matriz mineralizada, os quais estão envolvidos na expressão do fenótipo odontoblástico e diferenciação celular. Por fim, para aproximar este estudo das condições encontradas in vivo, serão empregados modelos de cultura 3D associados à discos de dentina adaptados no interior de câmaras pulpares artificiais com pressão pulpar simulada (pCPA), para avaliar o potencial do scaffold em terapias de indução celular (cell free tissue engineering system). Os scaffolds e a cultura 3D serão avaliados quanto aos parâmetros de viabilidade, proliferação, adesão/espalhamento celular e expressão do fenótipo odontoblástico por um período de até 21 dias. Os dados numéricos, obtidos através da aplicação dos protocolos laboratoriais, serão submetidos à análise estatística específica. (AU)