Papel do exercício físico na regulação da proteína Notch1 em camundongos obesos: efeitos sobre a lipogênese e gliconeogênese hepática.

Resumo

A proteína Notch1 apresenta uma importante função no metabolismo hepático. Em condição de jejum, a Notch1 atua na ativação da gliconeogênese e em condições pós-prandiais, atua no controle da lipogênese hepática. Nesse sentido, observou-se, em indivíduos obesos, que a Notch1 se correlaciona com resistência à insulina no fígado e com a doença hepática não gordurosa, o que a torna um interessante alvo de pesquisa. No combate a estes distúrbios metabólicos atrelados ao excesso de adiposidade corporal, o exercício físico tem sido utilizado como intervenção não farmacológica, pois é capaz de modular proteínas envolvidas tanto na gliconeogênese como na lipogênese. Tais efeitos do exercício estão associados a prevenção e tratamento da hiperglicemia e acúmulo de gordura no fígado. Entretanto, os mecanismos pelos quais o exercício físico atua no controle dessas vias no fígado não foram totalmente elucidados. Sendo assim, o presente estudo tem como objetivo verificar o papel do exercício físico na modulação da proteína Notch1 no tecido hepático de camundongos obesos e sua contribuição no controle da lipogênese e gliconeogênese. Para tanto, utilizaremos camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura e animais geneticamente modificados (ob/ob). Após a indução da obesidade, os roedores obesos serão distribuídos em dois grupos: sedentário e treinado. Os animais do grupo treinado realizarão protocolo de corrida em esteira, com intensidade correspondente a 70% da velocidade máxima de corrida, por período de quatro semanas. Ao término do protocolo de exercício (24 horas após), fragmentos do tecido hepático serão extraídos e serão feitas análises do RNAm através da técnica de RT-PCR e também do conteúdo proteico de moléculas chaves no controle da lipogênese, gliconeogênese e da sinalização da Notch1 através da técnica de Western Blotting. Também avaliaremos o acúmulo de gordura no tecido hepático através da técnica de histologia pela marcação com oil red. Verificaremos a atividade mitocondrial pelo equipamento Oroboros. Por fim, utilizaremos um inibidor da atividade da Notch1 para confirmar os efeitos obtidos pelo treinamento físico na modulação da sinalização da proteína Notch1 hepática. Ao final do experimento, espera-se elucidar quais as principais alterações nas principais vias envolvidas na gliconeogênese e lipogênese, em especial da via da Notch1, nos diferentes grupos experimentais, fornecendo assim, novos mecanismos de ação do exercício físico para as desordens metabólicas atreladas a obesidade e co-morbidades associadas.