Programação oncotoxicológica pela exposição materna à mistura de diferentes ftalatos: integração do perfil de expressão de miRNAs e mRNAs para reconstrução de redes de regulação gênica associadas à oncogênese

Resumo

A incidência de doenças crônicas como o diabetes e a obesidade, bem como de doenças genéticas como o câncer, tem aumentado nas últimas décadas em decorrência de diversos fatores socioeconômicos e ambientais que parecem interferir no desenvolvimento, incidência e prognóstico dessas afecções. Com relação ao câncer, o fator temporal distancia em até 50-60 anos as etapas de iniciação e progressão tumoral, e dessa forma a manifestação do câncer pode ocorrer muitos anos após o contato com um possível fator etiológico. Dessa forma, o interesse por fatores ambientais que interfiram no desenvolvimento intrauterino e promovam alterações morfofuncionais, genéticas e epigenéticas transitórias ou permanentes, incluindo as que podem ser transmitidas aos descendentes, configuram uma área de extremo interesse científico. A literatura tem demonstrado que algumas substâncias tóxicas têm a capacidade de aumentar a susceptibilidade ao câncer, criando uma perspectiva científica de grande interesse ao nosso grupo que denominamos oncotoxicologia. Os ftalatos representam um grupo de substâncias utilizadas na indústria e são encontrados em diferentes concentrações na urina e no plasma de seres humanos. Assim, o objetivo desse estudo será o de investigar se a exposição gestacional e lactacional a diferentes concentrações de uma mistura de ftalatos é capaz de alterar a expressão de mRNAs e miRNAs nas gerações F1 e F2, e ainda, verificar se essas alterações tem relação com alvos envolvidos na oncogênese da próstata, bem como, tentar correlacionais essas alterações com alterações observadas em tumores prostáticos de roedores e humanos através de análise de dados moleculares depositados em plataformas, como por exemplo, o TCGA (The Cancer Genome Atlas -Cancer Genome). Para alcançar esse objetivo, ratas prenhes da linhagem Lewis serão aleatoriamente divididas em 4 grupos experimentais: controle (veículo); 20 µg/kg/dia, 200 µg/kg/dia, 200 mg/kg/dia) e receberão as respectivas doses da mistura por gavagem na seguinte proporção: 19% DEHP (Bis(2-ethylhexyl) phthalate), 36% DEP (Diethylphthalate), 15% DBP (Di-n-butilphthalate), 10% DiBP (DiisobutylPhthalate), 8% BBzP (Butylbenzylphthalate), and 10% DiNP (Diisononylphthalate); e serão expostas do dia gestacional 10 (DG10) ao dia pós-natal 21 (DPN21). Os machos da geração F1 serão eutanasiados no DPN22 e DPN120. Alguns machos da geração F1 serão acasalados com fêmeas não expostas e os seus descendentes (F2) serão eutanasiados no DPN22. A próstata ventral dos animais da geração F1 (DPN22) será coletada para a análise molecular (transcriptoma e miRNoma) por sequenciamento de última geração (HigSeq-2000 Illumina); enquanto que para os DPN120 (F1) e DPN22 (F2) os alvos preditos pelo sequenciamento (F1-DPN22) serão avaliados por RTq-PCR. Após as análises moleculares propostas, os dados serão trabalhados, integrados e comparados entre os grupos experimentais, com amostras positivas para adenocarcinoma prostático em ratos (banco de amostras do nosso grupo) e com bases de dados disponíveis na literatura, incluindo dados de adenocarcinoma prostático humano. (AU)