Preparo de amostras e LC-MS para análises metabolômica e expossômica: estudos e aplicação para matrizes biológicas diversas

Resumo

A metabolômica tem requerido a evolução de protocolos analíticos e de bioinformática. Os avanços nessa ciência demonstram aplicações que vão de microrganismos e plantas até problemas toxicológico/ambientais relacionados à exposição de humanos a contaminantes químicos. O sucesso de um experimento em metabolômica depende de planejamento, coleta da amostra, extração, análise do extrato, processamento dos dados e análise estatística, etapas que ainda requerem estudos. Nesta proposta, buscam-se avanços na análise de amostras biológicas por plataformas metabolômicas baseadas em LC-MS, bem como o desenvolvimento de análises de contaminantes químicos do ambiente nessas amostras, com aplicações em expossômica. Os conhecimentos do proponente em microextrações e LC-MS serão associados à especialização e plataformas em metabolômica e expossômica, do grupo de pesquisa no exterior, de maneira a buscar-se evolução nas análises de toxicantes e metabólitos endógenos e exógenos por abordagens alvo e não-alvo, em diversas amostras relacionadas à gravidez (tecidos da placenta, soro do cordão umbilical e materno). Por meio de um protocolo de comparação entre partos a termo e pré-termo, técnicas e métodos miniaturizados de análise serão investigados na determinação do intervalo dinâmico de concentração de metabólitos, xenobióticos selecionados e seus produtos de biotransformação. Além dos avanços analíticos em miniaturização aplicados a metabolômica, deve-se avaliar: (I) a variação dos perfis metabólicos entre os diferentes tecidos e localização da amostragem (e.g., lado fetal ou materno da placenta), (II) se uma amostragem aleatória é efetiva na análise metabolômica da placenta e demais tecidos, (III) a existência/identidade de marcadores metabólicos de partos prematuros. Finalmente, o estágio propiciará a expansão dos conhecimentos do proponente nas áreas emergentes de metabolômica e expossômica, em grupo criteriosamente selecionado, e com perspectiva de futuras colaborações e aplicações no grupo do proponente, nessa área e a partir de demanda já existente nesse sentido, contribuindo para o sucesso dos projetos do grupo no país. (AU)