ISOLAMENTO E GENOTIPAGEM DE Bartonella spp. EM MAMIFEROS RESERVATÓRIOS DOMÉSTICOS E SELVAGENS NO BRASIL

Resumo

A bartonelose, uma zoonose emergente, é causada por bactérias Gram-negativas pertencentes ao gênero Bartonella. Esse grupo de patógenos transmitidos por vetores artrópodes engloba agentes altamente adaptados a uma ampla variedade de hospedeiros, causando diferentes manifestações clínicas a depender da espécie e do hospedeiro envolvido na infecção. Embora roedores, quirópteros e felinos domésticos sejam considerados importantes reservatórios para espécies de Bartonella em todo o mundo, poucos ou inexistentes são os estudos conduzidos no Brasil acerca do isolamento e diversidade genotípica de Bartonella spp. nestas espécies de mamíferos e seus respectivos ectoparasitas. Desta forma, o presente estudo tem por objetivos isolar e caracterizar, por meio de métodos microbiológicos e moleculares, membros do gênero Bartonella em amostras de sangue/tecidos de roedores sinantrópicos, quirópteros, felinos domésticos e seus ectoparasitas em determinadas localidades no Brasil. Para tal, amostras de DNA de sangue e/ou tecidos dos mamíferos amostrados, assim como as obtidas dos seus ectoparasitas, serão submetidas à triagem para detecção de Bartonella por meio da qPCR baseada no gene nuoG. Adicionalmente, as amostras de sangue total dos animais serão submetidas à cultura líquida de enriquecimento e, posteriormente, à cultura sólida. As culturas positivas, assim como as amostras de DNA dos ectoparasitas e sangue/tecidos, serão submetidas à ensaios de cPCR adicionais baseados nos fragmentos gênicos 16S rRNA, gltA, rpoB, ftsZ, pap-31, groEL e ribC e na região intergênica 16S-23S rRNA (ITS). Amostras de ectoparasitas e de sangue/tecidos positivas nos ensaios de cPCR terão os amplicons de diferentes regiões gênicas de Bartonella clonados (Multi Locus Sequencing Typing - MLST). As amostras serão então sequenciadas pelo método de Sanger e as sequências amplificadas serão confrontadas com aquelas previamente depositadas no Genbank e posteriormente submetidas à inferência filogenética utilizando-se os métodos de "Maximum Likelihood" e Bayesiana. Adicionalmente, serão conduzidas análises de Median Network. Os resultados do presente estudo contribuirão para a elucidação da diversidade genética de espécies de Bartonella circulando entre reservatórios mamíferos e entre seus respectivos ectoparasitas em nosso território. (AU)