Criação de organóide de saco vitelino de mamíferos

Resumo

As funções hematopoéticas, imunológicas, metabólicas e nutricionais do saco vitelino (SV) já são conhecida durante o desenvolvimento embrionário inicial. Mas o conhecimento sobre seu mecanismo de transporte e possíveis disfunções e consequente interferência no aborto inicial continua incerto. E a cultura bidimensional in vitro (2D) dessa estrutura não fornece informações precisas sobre a composição, arquitetura e função deste tecido. Então, para resolver este problema e obter conhecimento da formação da estrutura em questão, optamos por usar a cultura tridimensional in vitro (3D) chamada "organóides", que contém pequenas populações de células-tronco juntamente com células de linhagens diferenciadas, mimetizando a composição encontrada no tecido in vivo. Além disso, esta cultura celular pode ser usada como modelagem de doenças e para estudos toxicológicos / farmacêuticos. Os modelos animais bovino, suíno e canino foram escolhidos devido aos diferentes tipos de placentação que essas espécies possuem (sinepiteliocorial, epiteliocorial e hemocorial respectivamente), a fim de comparar as características das futuras estruturas formadas e suas funções de transporte durante o processo de placentação. Para o desenvolvimento do organóide de saco vitelino, foi escolhida a técnica utilizando o matrigel (Corning) juntamente com diferentes protocolos de meios de cultura para testar diferentes fatores de crescimento. Para a caracterização das estruturas formadas serão utilizadas as técnicas de RT-PCR, imunohistoquímica e microscopia eletrônica.