Análise do efeito modulador dos anticorpos IgG de indivíduos atópicos ao ácaro Dermatophagoides pteronyssiunus na maturação e produção de citocinas de linfócitos intratímicos humanos

Resumo

Nos últimos anos, nosso grupo tem investigado o efeito dos anticorpos IgG como mediadores da regulação de respostas alérgicas. Esta linha de pesquisa teve origem na observação de que a IgG de mães imunizadas com o ácaro Dermatophagoides pteronyssinus (Der p) é transmitida ao filhote durante a gestação sua detecção no soro do filhote está diretamente relacionada a inibição do desenvolvimento de alergias em resposta ao mesmo ácaro (Victor et al., 2003). A a partir daí, investigamos este mecanismo de forma translacional com abordagens murinas e humanas, o que tem demonstrado o efeito modulador da IgG sobre a maturação de linfócitos B e T em ambas as espécies (De Oliveira, Marília Garcia et al., 2017; Sgnotto et al., 2017; De Oliveira, Lira, Sgnotto, Inoue, Beltrame, et al., 2018; De Oliveira, Lira, Sgnotto, Inoue, Duarte, et al., 2018; Lira et al., 2018; Sgnotto et al., 2018). Porém, ainda não é descrita na literatura uma abordagem humana onde tenha sido considerada a especificidade alérgica dos doadores da IgG e, por ser o ácaro Der p o mais frequente antígeno indutor de respostas alérgicas em humanos no mundo, este alérgeno é considerado prioritário em investigações sobre mecanismos de regulação de alergias. Neste contexto, este projeto objetiva a análise do efeito dos anticorpos IgG purificados de indivíduos alérgicos ao ácaro Der p sobre a maturação e produção de citocinas de linfócitos humanos com reconhecida importância no mecanismo de indução e regulação de resposta alérgicas. Entre eles destacamos os linfócitos iNKT, TCD4, TCD8, Tgammadelta e B, e as citocinas IL-4, IFN-gama, IL-13, IL-9, IL-17 e IL-22. Além disso, pretendemos realizar análises da expressão de moléculas de ativação e homing (migração celular) destes linfócitos incluindo as moléculas CLA, CCR6, CD25 e integrina Alfa4Beta7. Para tanto serão realizados diversos procedimentos que incluem a obtenção e processamento de amostras de tecido tímico humano, identificação e obtenção de amostras de soro e IgG purificada de indivíduos alérgicos ao ácaro Der p, realização de culturas celulares em diversas condições experimentais e controles, e a realização de citometrias de fluxo para identificação das populações celulares bem como de seu fenótipo e produção intracelular de citocinas. Os resultados obtidos com a execução desta proposta serão inéditos e colaboram com a elucidação do mecanismo de regulação da susceptibilidade ao desenvolvimento de alergias bem como do sistema imune de forma geral.