Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade com vetor Ad-HD e helper de sorotipos distantes

Resumo

A terapia gênica através de vetores virais possui grande potencial, já sendo usado em protocolos clínicos em humanos. Os vetores adenovirais de terceira geração (alta capacidade, gutless, ou helper-dependentes-HD) são mais seguros que os vetores de primeira geração, porém a principal limitação para a sua aplicação em larga escala diz respeito à obtenção de partículas virais livres da contaminação pelo vírus helper. Os adenovírus de sorotipos filogeneticamente próximos possuem capacidade de empacotamento cruzado, porém vírus mais filogeneticamente distantes não. Assim desenvolveremos vetores adenovirais de alta capacidade, que possam ser produzidos por um vetor helper, que seja filogeneticamente distante e, portanto, incapaz de ser empacotado e presente como contaminante na preparação do Ad-HD. Eliminar a contaminação pelo vírus helper tem um grande potencial para aumentar o emprego dos vetores Adenovirais de alta capacidade. Neste Projeto serão construídos um vetor Ad-HD com sequência de empacotamento derivado de adenovírus de sorotipo 12, um vetor helper derivado de adenovírus de sorotipo 5 e linhagens celulares empacotadoras expressando as proteínas virais sorotipo específicas, IVA2, IIIa e L1 52/55k, que irão permitir o empacotamento específico do vetor Ad-HD, eliminando a presença do vírus helper. (AU)