Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade expressando genes com atividade antitumoral

• Processo: 19/15619-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2019
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Rodrigo Esaki Tamura
• Beneficiário: Rodrigo Esaki Tamura
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Cristina Viana Niero ; Ileana Gabriela Sánchez de Rubió ; João Henrique Ghilardi Lago ; Julio Cezar Franco de Oliveira
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/02802-1 - Clonagem do gene cyclodipeptide synthases de Nocardiopsis prasina em vetor de expressão eucariótica para avaliação de sua atividade antitumoral, BP.IC; 23/11322-0 - Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade expressando o gene Azurin e avaliação de atividade antitumoral, BP.MS; 23/03195-9 - Desenvolvimento de vetores adenovirais de alta capaidade com diferentes abordagens terapêuticas para a terapia antitumoral, BP.DD; + mais bolsas vinculadas 23/01291-0 - Avaliação da atividade antitumoral de Azurin por transferência gênica mediada pela crotamina em células de melanoma., BP.IC; 23/02034-1 - Estudo da capacidade de fármacos em inibir a resposta pró inflamatória pulmonar mediada por NSP3 de SARS-CoV-2 através da modulação da via de STAT3, BP.IC; 22/14015-9 - Identificação de produtos bacterianos com atividade antitumoral em uma biblioteca bacteriana obtida de material de compostagem do Zoológico de São Paulo, BP.IC; 21/03418-2 - Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade expressando o cassete de expressão HSVtk e IL-12 otimizado sob controle de promotor de calcitonina, BP.MS; 21/02659-6 - Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade com vetor Ad-HD e helper de sorotipos distantes, BP.MS; 20/08271-7 - Desenvolvimento de sistema adenoviral de alta capacidade expressando genes com atividade antitumoral, BP.JP - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Adenovirus Terapia genética Toxinas bacterianas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: adenovirus | Sorotipos | terapia genica | toxinas bacterianas | vetores virais | terapia gênica

Resumo

A terapia gênica através de vetores virais possui grande potencial, já sendo usado em protocolos clínicos em humanos. Os vetores adenovirais de terceira geração (alta capacidade, gutless, ou helper-dependentes-HD) são mais seguros que os vetores de primeira geração e possuem alta capacidade de inserção genica, porém a principal limitação para a sua aplicação em larga escala diz respeito à obtenção de partículas virais livres da contaminação pelo vírus helper. Os adenovírus de sorotipos filogeneticamente próximos possuem capacidade de empacotamento cruzado, porém vírus mais filogeneticamente distantes não. Assim desenvolveremos um sistema adenoviral de alta capacidade, em que o vetor gutless e o vetor helper, sejam filogeneticamente distantes e, portanto, o vetor helper seja incapaz de ser empacotado e presente como contaminante na preparação do Ad-HD. Eliminar a contaminação pelo vírus helper tem um grande potencial para aumentar o emprego dos vetores Adenovirais de alta capacidade. Pretendemos empregar vetores adenovirais como veículos para a transferência de genes com atividade antitumoral. Serão empregadas estratégias de expressão de gene suicida aliada a gene imunomudulatório com expressão condicional e de produção de toxinas bacterianas. Os genes da timidina quinase do vírus da Herpes Simplex (HSVtk) e Interleucina-12 (IL-12) são muito bem descritos, sendo um ótimo modelo para iniciar estes estudos, pretendemos clonar os genes HSVtk e IL-12 otimizado em vetor adenoviral com promotor responsivo a calcitonina e avaliar a sua atividade sobre células de carcinoma medular de tireóide. Outro gene que será avaliado é o gene Azurin, que possui atividade seletiva somente sobre células tumorais. Dessa forma iremos avaliar estes vetores quanto à capacidade de induzir morte das células tumorais in vitro e in vivo. Atualmente estamos investigando uma larga biblioteca bacteriana quanto à capacidade de produzir produtos capazes de inibir a viabilidade de células de câncer de próstata, havendo assim a perspectiva de identificação de novos genes bacterianos com atividade antitumoral. (AU)

Publicações científicas

(7)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

NATÁLIA MENESES ARAÚJO; ILEANA GABRIELA SANCHEZ RUBIO; NICHOLAS PIETRO AGULHA TONETO; MIRIAN GALLIOTE MORALE; RODRIGO ESAKI TAMURA. The use of adenoviral vectors in gene therapy and vaccine approaches. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 45, n. 3, 2022-10-07. (19/15619-2, 21/03418-2, 20/08271-7, 21/02659-6)

RODRIGUES, MARIANA TEIXEIRA; MICHELLI, ANA PAULA PICARO; CASO, GUSTAVO FELISOLA; DE OLIVEIRA, PALOMA RAMOS; RODRIGUES-JUNIOR, DORIVAL MENDES; MORALE, MIRIAN GALLIOTE; MACHADO JUNIOR, JOEL; BORTOLUCI, KARINA RAMALHO; TAMURA, RODRIGO ESAKI; DA SILVA, TAMIRIS REISSA CIPRIANO; et al. Lysicamine Reduces Protein Kinase B (AKT) Activation and Promotes Necrosis in Anaplastic Thyroid Cancer. PHARMACEUTICALS, v. 16, n. 12, p. 18-pg., 2023-12-01. (14/24549-4, 23/02690-6, 19/15619-2)

SIMABUCO, FERNANDO MOREIRA; TAMURA, RODRIGO ESAKI; BETIM PAVAN, ISADORA CAROLINA; MORALE, MIRIAN GALLIOTE; VENTURA, ARMANDO MORAIS. Molecular mechanisms and pharmacological interventions in the replication cycle of human coronaviruses. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 44, n. 1, 1, 2021. (19/15619-2, 16/25139-0, 18/08391-2, 18/14818-9, 20/05346-6)

MORALE, MIRIAN GALLIOTE; TAMURA, RODRIGO ESAKI; CINTRA, RICARDO; ARAUJO, NATALIA MENESES; VILLA, LUISA LINA. TLR4 and SARM1 modulate survival and chemoresistance in an HPV-positive cervical cancer cell line. SCIENTIFIC REPORTS, v. 12, n. 1, p. 12-pg., 2022-04-25. (16/25139-0, 19/15619-2, 08/57889-1, 08/03232-1)

SIMABUCO, FERNANDO MOREIRA; TAMURA, RODRIGO ESAKI; BETIM PAVAN, ISADORA CAROLINA; MORALE, MIRIAN GALLIOTE; VENTURA, ARMANDO MORAIS. Molecular mechanisms and pharmacological interventions in the replication cycle of human coronaviruses. GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY, v. 44, n. 1, p. 18-pg., 2021-01-01. (16/25139-0, 19/15619-2, 18/14818-9, 20/05346-6, 18/08391-2)

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MORALE, MIRIAN GALLIOTE; TAMURA, RODRIGO ESAKI; SANCHEZ RUBIO, ILEANA GABRIELA. Metformin and Cancer Hallmarks: Molecular Mechanisms in Thyroid, Prostate and Head and Neck Cancer Models. BIOMOLECULES, v. 12, n. 3, p. 18-pg., 2022-03-01. (16/25139-0, 19/15619-2, 20/08271-7)