Obtenção e caracterização de anticorpos monoclonais recombinantes não glicosilados contra pontos de controle imunológico, para uso como moléculas terapêuticas antitumorais e antivirais

Resumo

Pontos de controle imunológico ou checkpoints imunológicos, são receptores de regulação negativos expressos nas células imunes. Sob condições fisiológicas normais, sua função é servir de freios para o sistema imunológico, mantendo a auto tolerância e prevenindo danos aos tecidos. Entretanto, essas moléculas também participam de mecanismos de escape ao sistema imune, causando disfunções nas populações de células T, em uma variedade de doenças como câncer e infecções virais, incluindo a causada pelo vírus SARS-CoV-2. O bloqueio destes receptores inibitórios com anticorpos monoclonais é utilizado em terapias que almejam resgatar a atividade de células efetoras cronicamente exauridas, a fim de restabelecer a resposta do sistema imune. Atualmente, existem seis pontos de controle imunes envolvidos com infecção viral, além do histórico como imunoterapia antitumoral, entre eles, PD-1, LAG-3 e TIM-3 se destacam pelo envolvimento com alterações das funções dos linfócitos T em doenças como HIV, gripe, hepatite e a COVID-19. Neste contexto, este projeto propõe a obtenção e caracterização de anticorpos monoclonais recombinantes contra bloqueadores dos pontos de controle imunológico PD-1, TIM-3 e LAG-3, a partir de seleção por phage display, utilizando uma biblioteca de anticorpos humana sintética, e sua posterior expressão procariótica em linhagem de E. coli SHuffle, geneticamente adaptada para expressão citoplasmática de anticorpos monoclonais não-glicosilados. Tais anticorpos, após caracterizados quanto sua sensibilidade e especificidade, serão testados sozinhos ou em conjunto, como alternativas terapêuticas de ativação de linfócitos T em doenças como câncer e infecções virais, incluindo uma possível terapia para casos graves de COVID-19. A presente proposta portanto, consiste da inovação na obtenção de anticorpos recombinantes não glicosilados, produzidos em bactérias, abrindo novas possibilidades terapêuticas contra problemas atuais e futuros, visto que, uma vez padronizada a seleção de anticorpos contra esses pontos de controle imunológico, permitirá sempre que necessário testar um novas moléculas, pois haverá uma plataforma estabelecida para isso. (AU)