Oligômeros neurotóxicos do peptídeo beta-amiloide: isolamento bioquímico, estudos conformacionais e neutralização em modelos da Doença de Alzheimer

Resumo

O depósito de agregados proteicos anormais está associado a várias doenças neurodegenerativas. A mais prevalente delas, a doença de Alzheimer (DA), é caracterizada pelo acúmulo cerebral de agregados do peptídeo A beta. Embora a patogênese da DA não seja completamente compreendida, fortes evidências indicam que oligômeros solúveis de Abeta (AbOs) desempenham papel central na base molecular dessa demência. O objetivo principal desse projeto é contribuir para a compreensão da relação entre conformação e neurotoxicidade dos AbOs, com implicações para o tratamento da DA. Para isso, usaremos como ferramenta anticorpos artificiais do tipo scFv com alta seletividade para AbOs, chamados de NUsc's, desenvolvidos pelo nosso grupo. Usando um desses, NUsc1, desenvolvemos um ensaio para isolamento bioquímico de uma subpopulação neurotóxica de AbOs. Aplicaremos este método para estudar o estado oligomérico e a conformação dos AbOs isolados, por técnicas bioquímicas e biofísicas. Em paralelo, estudaremos o potencial de neuroproteção da combinação da neutralização de AbOs por NUsc1 ao estímulo neuroprotetor da miocina irisina, usando modelos in vitro e in vivo. Investigar novas estratégias neuroprotetoras contra a toxicidade de AbOs é importante para incrementar o benefício cognitivo nos pacientes tratados com anticorpos terapêuticos dirigidos contra agregados de Abeta, como a IgG monoclonal aducanumab, recentemente aprovada para uso clínico pelo FDA. Como desfechos desse Projeto, esperamos determinar a massa molecular (e, portanto, o estado oligomérico) e detalhes conformacionais de AbOs tóxicos, e contribuir para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas mais eficientes contra a perda cognitiva em pacientes com a doença de Alzheimer. (AU)