Identificação de substâncias com atividade antifúngica a partir da hemolinfa e nódulos de melanização de Galleria mellonella imunizadas com Candida albicans

Resumo

As infecções fúngicas são um problema de saúde pública relevante para o Brasil e o mundo, com aumento significativo nas últimas décadas. Essas infecções podem afetar diferentes partes do corpo, como a pele, mucosas, pulmões e órgãos internos, causando sintomas que vão desde lesões cutâneas simples até infecções graves e potencialmente fatais. Dentre os tipos de infecções fúngicas, a candidíase se destaca pela alta prevalência e limitações de tratamento devido à toxicidade e resistência dos microrganismos aos antifúngicos. Este projeto de pesquisa tem como objetivo investigar os efeitos antifúngicos de substâncias presentes na hemolinfa e nos nódulos de melanização das larvas de Galleria mellonella após a imunização por Candida albicans. Para isso, o projeto será realizado em 6 etapas: 1) padronização das concentrações de C. albicans para a imunização larval e tempos de coleta da hemolinfa e nódulos de melanização; 2) Obtenção do extrato e frações do material coletado e identificação das substâncias presentes em cada fração; 3) Testes da atividade antifúngica das frações em culturas planctônicas de C. albicans, incluindo cepas sensíveis e resistentes a fármacos antifúngicos, e seleção de uma ou duas frações com maior atividade antifúngica para os ensaios subsequentes; 4) Análise dos efeitos das frações em biofilmes de C. albicans em termos de viabilidade celular e estrutura morfológica; 5) Análise da atividade antifúngica e efeitos citotóxicos das frações em um modelo celular tridimensional (3D); 6) Investigação dos mecanismos de ação das frações nas células de C. albicans, incluindo a análise da produção de espécies reativas de oxigênio e possíveis danos estruturais. Os dados obtidos serão submetidos a uma análise exploratória a fim de decidir se a estratégia adotada seguirá uma abordagem paramétrica ou não-paramétrica na análise inferencial. Os resultados obtidos poderão fornecer dados importantes sobre a atividade antifúngica das frações e seus possíveis mecanismos de ação, abrindo caminho para o desenvolvimento de novos compostos ou terapias baseadas em substâncias naturais para o tratamento de infecções fúngicas resistentes aos fármacos convencionais. Além disso, a avaliação da atividade das frações em diferentes modelos de estudo, incluindo culturas planctônicas, biofilmes, células persistentes e culturas celulares 3D, permitirá uma compreensão mais abrangente do potencial terapêutico dessas substâncias antifúngicas em diferentes estágios da infecção. (AU)