Riboswitch theo/metE como ferramenta de regulacao de transcrição em Xanthomonas citri

• Processo: 21/00729-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Henrique Ferreira
• Beneficiário: Henrique Ferreira
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Rio Claro. Rio Claro , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Rio Claro
• Assunto(s): Cancro (doença de planta) Fitopatologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: citrus canker | fitopatologia

Resumo

Xanthomonas citri subsp. citri (X. citri) é o agente causal do cancro cítrico asiático (ACC), doença que afeta citros mundialmente. ACC não tem cura e Produtores devem se valer de práticas de manejo integrado para prevenir o espalhamento da bactéria. O entendimento da biologia básica de X. citri torna-se essencial para se encontrar alvos potenciais/genéticos-bioquímicos para o controle da doença. Tradicionalmente, a genética microbiana usa deleção/disrupção gênica para investigar a função de genes. Entretanto, genes essenciais são difíceis de se estudar utilizando esta estratégia. Técnicas baseadas em small-RNAs e antisense-RNAs são poderosas na caracterização de genes, mas não ainda bem exploradas em procariotos. Uma alternativa seria os riboswitches, que derivam de bactérias, e podem controlar transcricao/traducao. Riboswitches são RNAs não codificadores capazes de modular a expressao gênica na presença de ligantes. Aqui, mostramos que o riboswitch theo/metE diminui a expressao de parB em X. citri usando uma plataforma responsiva a theophylline. Monitorando respiracao celular, mostramos que concentrações elevadas do ligante interferem com a viabilidade bacteriana. Assim, determinamos uma dose segura de theophylline a ser usada com X. citri. Finalmente, mostramos evidencias de que ParB é uma proteina estavel e que permanece funcional durante todo o ciclo celular bacteriano e é provavelmente passada para as celulas filhas durante divisão. (AU)