Identificação de autoimunidade para peptídeos da cadeia alfa 1 do colágeno tipo V como novos biomarcadores do estágio inicial da Esclerose sistêmica

• Processo: 21/02441-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2021
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunoquímica
• Pesquisador responsável: Ana Paula Pereira Velosa
• Beneficiário: Ana Paula Pereira Velosa
• Instituição Sede: Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Autoimunidade Biomarcadores Colágeno tipo V Escleroderma sistêmico Peptídeos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Autoimunidade | biomarcadores | colágeno tipo V | Esclerose sistêmica | peptídeos | Imunologia de Proteínas

Resumo

Pacientes com esclerose sistêmica (ES) apresentam desregulação imunológica, vasculopatia e fibrose da pele e de vários órgãos internos. A fibrose pulmonar leva à doença pulmonar intersticial (DPI) associada à ES, que é a principal causa de morbimortalidade na ES. Recentemente, a autoimunidade ao colágeno tipo V (Col V) foi caracterizada na fibrose pulmonar idiopática e parece estar relacionada ao desenvolvimento na ES. Nosso objetivo foi avaliar a autoimunidade às cadeias Col V ±1 (V) e ±2 (V) e aos peptídeos antigênicos dessas cadeias Col V em soros com ES precoce empregando tecido pulmonar de SSc-ILD, como fonte de antígeno. Verificamos que as amostras de soro de pacientes com ES precoce foram reativas para Col V (41,18%) e apresentaram imunorreatividade para os peptídeos Col5A1 (1,049) e Col5A1 (1,439). A IgG isolada de soros positivos para anti-Col V de pacientes com ES precoce (anti-ColV IgG) foi adsorvida com a cadeia ±1 (V) (anti-ColV IgG / ads-±1 (V)) e cadeia ±2 (V) (anti- ColV IgG / ads-±2 (V)) e biotinilada para avaliar o espectro de reatividade em biópsias pulmonares de pacientes com ES-DPI por imunofluorescência. As amostras de tecido pulmonar ES-DPI imunomarcadas com anti-ColV IgG mostraram fluorescência verde aumentada na membrana basal vascular, músculo liso bronquiolar e camada adventícia, contrastando com a imunocoloração tenue nos pulmões controle. A expressão da proteína Col V nestes compartimentos pulmonares imunocorados com ES precoce anti ColV IgG foi confirmada por ensaios de co-localização imunológica com anticorpos Col V comerciais anti-humanos. Além disso, os tecidos pulmonares ES-DPI imunocorados com anti-ColV IgG / ads-±1 (V) (amostra na qual os anticorpos específicos da cadeia Col V ±1 foram removidos) mostraram fluorescência verde diminuída em comparação com anti-ColV IgG e anti-ColV IgG / ads ±2 (V). Nossos dados mostram que a autoimunidade a Col V no início da ES estava relacionada a peptídeos da cadeia ±1 (V), sugerindo que esses anticorpos poderiam ser biomarcadores de estágios de ES e potenciais alvos de imunoterapia com peptídeos imunogênicos Col V. (AU)