Uso do antagonista do receptor IL-1 (Anakinra) sobre a imunidade inata: efeito da morte encefálica e da preservação do rim à frio

• Processo: 20/13510-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2024
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mario Abbud Filho
• Beneficiário: Mario Abbud Filho
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Imunidade inata Morte encefálica Transplante de órgãos Transplante de rim Proteína antagonista do receptor de interleucina 1 Isquemia fria Expressão gênica Extração de RNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: doadores falecidos com critérios estendidos | imunidade inata | Interleucina IL-1 beta | morte encefálica | Transplante renal | Transplante de Órgãos

Resumo

A morte encefálica (ME) desencadeia uma inflamação sistêmica com consequente ativação de vias inflamatórias nos órgãos doados para transplantes. Rins provenientes de doadores falecidos com critérios estendidos (ECD) ou com elevados escores de risco (KDPI > 85%) considerados rins "não-ideais", poderiam ser usados, mas têm sido descartados pelas equipes de Tx por terem desfechos inferiores, piorando a escassez de órgãos para Tx. O tempo prolongado de isquemia fria (TIF) também pode estar envolvido na mudança do perfil inflamatório desses rins. Em estudo prévio relatamos que moléculas das vias da imunidade inata são mais expressas nos rins "não-ideais", do que em rins de doadores com critério padrão (SCD). Uma dessas moléculas muito expressas é a interleucina IL-1² e baseados nessa observação elaboramos a hipótese que o bloqueio dessa molécula poderia reduzir a resposta inflamatória inata, amenizando a inflamação estéril e melhorando a qualidade dos rins "não-ideais". Objetivos: Avaliar o efeito da administração do antagonista do receptor da IL-1 (Anakinra) na expressão gênica e proteica relacionados à imunidade inata e inflamação estéril, em rins de ratos, após o processo de ME e com tempo de isquemia fria prolongado. Métodos. Serão utilizados ratos machos da linhagem Wistar divididos em 4 grupos: ratos sham (n=6), ratos controles com indução da ME e sem tratamento (n=6); 3) ratos com indução da ME e administração de Anakinra em 2 doses diferentes (0,5mg/kg (n=6) e 1mg/kg (n=6)) no momento da ME. Após 6 horas de manutenção da ventilação os rins dos animais serão perfundidos e preservados com solução de Euro-Collins e analisados nos tempos 12h e 24h de preservação a frio. A partir das amostras de rins coletadas, será realizada a extração de RNA total para expressão gênica por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) utilizando o sistema TaqMan Gene Expression Array Plates para moléculas envolvidas na resposta imune inata além de análises histológicas e imuno-histoquimicas. A análise estatística descritiva incluirá frequências absolutas e relativas para variáveis categóricas e médias, medianas, desvio padrão e variação para variáveis contínuas. Comparação de grupos de variáveis categóricas será realizada pelo teste qui-quadrado ou exato de Fisher, quando apropriado. Valores de P < 0,05 serão considerados significantes. (AU)