Atividade colagenásica de Bromelaína imobilizada em nanopartículas de ouro para aplicações terapêuticas.

• Processo: 21/07667-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2021
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2022
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica
• Pesquisador responsável: Marcelo Yudi Icimoto
• Beneficiário: Marcelo Yudi Icimoto
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/01487-7 - Nanopartículas de ouro associadas à cisteíno-proteases derivadas de Bromelaína: caracterização estrutural e ação colagenolítica, AP.R
• Assunto(s): Colágeno Nanopartículas de ouro Nanotecnologia Peptídeo hidrolases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bromelaína | colageno | nanoparticulas de ouro | Nanotecnologia | Proteases | Purificação Cromatográfica de Enzimas aplicadas à nanotecnologia

Resumo

A bromelaína (Bro) é um complexo multiproteico extraído do abacaxi (Ananas comosus) e composto por pelo menos oito cisteíno-proteases. Bro apresenta uma ampla gama de aplicações na medicina e na indústria, e a estabilidade/atividade de suas frações proteolíticas é sempre um fator limitante. O presente estudo descreve a melhora da estabilidade e ganho de atividade específica no conteúdo enzimático de Bro imobilizado em nanopartículas de ouro (GNPs). GNPs foram sintetizados in situ usando Bro como agente redutor e estabilizador e caracterizados por ressonância plasmônica de superfície e microscopia eletrônica de transmissão. Consistente com as mudanças estruturais observadas pela análise de dicroísmo circular, a associação com GNP regula a atividade enzimática. Bro ativa imobilizado em GNPs (NanoBro) permanece estável sob armazenamento e ganha estabilidade térmica consistente com uma enzima termofílica. Ensaios proteolíticos realizados em membranas de colágeno tipo I foram demonstrados em espectroscopia de fluorescência de O-ftaldialdeído (OPA), e resultam em alterações na estrutura superficial da membrana, observados por microscopia eletrônica de varredura, FTIR e microscopia confocal de varredura a laser. Outra característica do NanoBro observada foi o aumento significativo da suscetibilidade ao efeito inibitório do E-64, indicando um ganho na atividade da cisteíno-protease. Maior estabilidade e atividade específica do NanoBro contribuem para a ampliação e melhoria das aplicações utilizadas de Bro. (AU)