2-hidroxichalcona como um composto potente e fotossensibilizador contra biofilmes de dermatófitos

• Processo: 21/08328-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2021
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2022
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Maria José Soares Mendes Giannini
• Beneficiário: Maria José Soares Mendes Giannini
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/02785-9 - Dermatófitos e Dermatofitoses: formação de biofilme e desenvolvimento de estratégias de controle., AP.R
• Assunto(s): Biofilmes Terapia fotodinâmica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biofilm | dermatophytes | Photodynamic Therapy | fármacos-micologia

Resumo

Dermatófitos, fungos causadores de dermatofitose, podem invadir tecidos queratinizados em humanos e animais. A capacidade de formação de biofilme desses fungos foi descrita recentemente e pode estar relacionada ao longo período de tratamento e recorrências comuns dessa micose. Neste estudo, avaliamos a atividade anti-dermatofítica e anti-biofilme da 2-hidroxichalcona (2-chalcona) no escuro e da terapia fotodinâmica (TFD) para determinar seu mecanismo de ação. As cepas de Trichophyton rubrum e Trichophyton mentagrophytes foram utilizadas no estudo. O teste de susceptibilidade antifúngica de células planctônicas, biofilmes em estágio inicial e biofilmes maduros foi realizado usando métodos colorimétricos. As topografias foram visualizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Monocamadas de queratinócitos de pele humana (HaCat) também foram utilizadas nos ensaios de citotoxicidade. Os mecanismos de ação da 2-chalcona no escuro e sob fotoexcitação foram investigados usando microscopia confocal e quantificação de ergosterol, espécies reativas de oxigênio (ROS) e indução de morte por apoptose / necrose. Todas as cepas, na forma planctônica, foram inibidas após o tratamento com 2-chalcona (concentração inibitória mínima (MIC) = 7,8-15,6 mg / L), terbinana (TRB) (MIC = 0,008-0,03 mg / L) e uconazol ( FLZ) (1-512 mg / L). Biofilme em estágio inicial e biofilme maduro foram inibidos por 2-chalcona em concentrações de 15,6 mg / L e 31,2 mg / L em todas as cepas testadas. No entanto, os biofilmes maduros foram resistentes a todos os antifúngicos testados. Quando células planctônicas e biofilmes (estágio inicial e maduro) foram tratados com PDT mediada por 2-chalcona, as concentrações inibitórias foram reduzidas em quatro vezes (2-7,8 mg / L). Imagens de MEV de biofilmes tratados com 2-chalcona mostraram colapso da parede celular, resultante de um provável extravasamento de conteúdo citoplasmático. A toxicidade da 2-chalcona em células HaCat apresentou maiores valores de IC50 no escuro do que sob fotoexcitação. Além disso, a 2-chalcona tem como alvo o ergosterol na célula e promove a geração de ROS, resultando em morte celular por apoptose e necrose. No geral, a PDT mediada por 2-chalcona é uma candidata promissora e segura contra dermatófitos, particularmente no tratamento anti-biofilme. (AU)