Perfil sorológico, epidemiológico e genético de Toxoplasma gondii a partir de tecidos reprodutivos de cães e gatos

• Processo: 20/03972-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2022
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Protozoologia de Parasitos
• Pesquisador responsável: Cinara de Cássia Brandão
• Beneficiário: Cinara de Cássia Brandão
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Fernando Henrique Antunes Murata ; Luiz Carlos de Mattos
• Bolsa(s) vinculada(s): 22/08270-6 - Genotipagem de Toxoplasma gondii isolado em tecidos reprodutivos de cães e gatos, BP.TT
• Assunto(s): Doenças transmissíveis Toxoplasmose Toxoplasma gondii Gatos Cães Análise do polimorfismo de comprimento de fragmentos amplificados Sequenciamento de nova geração
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Genótipos de Toxoplasma gondii | Isolamento de Toxoplasma gondii | Pcr-Rflp | sequenciamento de nova geração | Tecidos Reprodutivos | Toxoplasma gondii | Doenças infecciosas e parasitárias

Resumo

Toxoplasmose é uma doença causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A presença de gatos é um fator determinante para a ocorrência da toxoplasmose, que juntamente com cães, servem de indicadores de contaminação ambiental por T. gondii, especialmente pela proximidade com humanos. Demonstrações deste parasito em tecidos reprodutivos (fêmeas e machos) de animais (testículos, ovários e útero), são inconclusivas e ainda carecem de maiores esclarecimentos. Tais tecidos são excelentes materiais biológicos para análises no sentido de se determinar o diagnóstico da infecção bem como para se conhecer a prevalência da toxoplasmose em áreas com maior índice de ocorrência de T. gondii. Os objetivos deste estudo são: 1. determinar a prevalência de anticorpos anti-T. gondii (IgG e IgM) em gatos e cães submetidos à esterilização, no Centro de Zoonoses de São José do Rio Preto; 2. isolar T. gondii dos tecidos reprodutivos por meio de bioensaio em camundongos e cultura de células; 3. genotipar, por meio de microssatélites e PCR-RFLP e sequenciamento de próxima geração (NGS), os isolados de T. gondii obtidos; 4. geocodificar os endereços dos animais com vistas a determinar áreas de risco. Amostras de sangue serão coletadas por punção da veia jugular, cefálica ou safena com os animais sob anestesia, para obtenção do soro e avaliação sorológica por teste de aglutinação modificada (MAT). Macerados de testículo, útero e ovário serão utilizados em bioensaios com camundongos Balb C de ambos os sexos, para obtenção de isolados de T. gondii. Os isolados obtidos serão avaliados para caracterização genômica por PCR-RFLP, por meio de 11 marcadores distintos: SAG1, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3. A geocodificação utilizará dados epidemiológicos dos animais (sexo, idade e bairro em que habita) para se determinar potenciais áreas de prevalência da infecção e da doença bem como da contaminação ambiental. Os resultados poderão contribuir para a caracterização de cepas de T. gondii em animais domesticados bem como naqueles de rua e favorecer a identificação e a caracterização da infecção ambiental e dos riscos. A caracterização genômica dos isolados poderão auxiliar a identificação de indicadores de virulência do T. gondii, bem como estabelecer potenciais relações com a infecção em humanos, incluindo cuidadores e tutores de animais de rua. (AU)