Avaliação in vitro das consequências moleculares após overload de albumina em podócitos

• Processo: 21/10387-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2022
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2025
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mara Sanches Guaragna
• Beneficiário: Mara Sanches Guaragna
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Adriana Souza Torsoni ; Luiz Fernando Onuchic ; Maricilda Palandi de Mello ; Vera Maria Santoro Belangero
• Auxílio(s) vinculado(s): 25/06326-2 - 15th International Podocyte Conference and ISGD Meeting 2025, AR.EXT
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/13911-6 - Expressão de integrinas e cd2ap após overload de albumina em cultura celular de podócitos com e sem dano, BP.MS; 24/00156-5 - Análise de expressão das proteínas integrinas alfa-3 beta-1 e alfa-v beta-3 por Western Blot e por Imunofluorescência, BP.TT; 22/14727-9 - Avaliação in vitro das consequências moleculares após overload de albumina em podócitos, BP.TT; 22/15448-6 - Avaliação in vitro das consequências moleculares após overload de albumina em podócitos, BP.TT
• Assunto(s): Nefrologia Insuficiência renal crônica Proteinuria Barreira de filtração glomerular Podócitos Albuminúria Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Avaliaçao in vitro | Avaliação molecular | barreira de filtração glomerular | Overload albumina | Podócitos com dano e sem dano | Proteinúria e Doença Renal Crônica | Nefrologia Pediátrica

Resumo

Proteinúria é um problema de saúde que afeta milhões de pessoas ao redor do mundo, sendo um importante sinal e marcador de prognóstico de doença renal crônica (DRC). A presença de proteinúria geralmente é um indicativo de comprometimento na seletividade da barreira de filtração glomerular (BFG). A BFG é composta por três camadas: endotélio fenestrado, membrana basal glomerular e podócitos. Os podócitos são células altamente especializadas, cujos pedicelos interdigitam-se formando entre si os diafragmas de fenda (SD). Os pedicelos possuem três regiões principais, chamadas de domínio SD, domínio apical de membrana (AMD) e domínio basal de membrana (AMD). Proteínas que se expressam nesses três domínios dos pedicelos possuem papel fundamental na sinalização celular e regulação da dinâmica do citoesqueleto de actina. Danos em quaisquer desses domínios levam a uma resposta característica, com o "effacement" dos pedicelos. Já se sabe que a lesão dos podócitos leva a albuminúria progressiva, no entanto, existem controvérsias em relação ao impacto da proteinúria para o agravamento do "effacement" nas podocitopatias. Várias moléculas participam da manutenção da BFG, entre elas a proteína receptora de canal de cálcio potencial transitório 6 (TRPC6) e a proteína adaptadora CD2 (CD2AP) presentes no domínio SD, as integrinas ±3²1 e ±½²3 no domínio BMD e a podocalixina, sialomucina de revestimento presente no AMD. Existem poucos estudos sobre as consequências moleculares resultantes da exposição prolongada ao overload de albumina em podócitos humanos in vitro. Portanto, os objetivos do presente trabalho são: 1) Identificar alteração de expressão dos genes TRPC6, CD2AP, ITGA3, ITGB1, ITGAV, ITGB3 e PODXL após overload de albumina (BSA) em podócitos humanos sem e com dano prévio induzido com puromicina aminoglicosídeo (PAN) e, nos casos que houver expressão alterada, identificar recuperação potencial do fenótipo após retirada de sobrecarga de albumina; 2) Identificar a alteração de adesão dos podócitos apos overload de albumina em podócitos sem e com dano prévio com PAN, e, nas situações que tenham apresentado anormalidades de adesão, identificar potencial recuperação de adesão dos podócitos após retirada do overload albumina. A partir desse estudo serão delineadas vias moleculares que poderão ser estudadas em modelo animal, e, inclusive, utilizadas como potenciais alvos terapêuticos, contribuindo para a desaceleração da progressão da DRC em muitos pacientes. (AU)