Efeitos da exposição intrauterina à nicotina sobre eventos celulares e epigenéticos nos ovários, reserva folicular ovariana e hormônios sexuais de ratas adultas

• Processo: 24/01377-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2026
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Camila Cicconi Paccola
• Beneficiário: Camila Cicconi Paccola
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Cristiane Damas Gil
• Assunto(s): Ciclo estral animal Nicotina Ovário Ratas Toxicologia reprodutiva
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ciclo Estral | nicotina | Ovário | ratas | reprodução feminina | Toxicologia da reprodução

Resumo

Estudos evidenciam alterações na fertilidade de proles expostas à nicotina, principal componente do cigarro. Os efeitos podem ocorrer durante o desenvolvimento pré e pós-natal, como alteração do início da puberdade e variação dos níveis de hormônios sexuais, tanto no sexo masculino quanto feminino, além de irregularidade dos ciclos reprodutivos e antecipação da menopausa. Porém, os dados existentes na literatura são conflitantes em relação ao tipo de alteração e à fase em que ocorrem, havendo necessidade de pesquisas que elucidem esses pontos. Desta forma, este trabalho tem como objetivo verificar os efeitos da exposição à nicotina, durante a fase intrauterina e a amamentação, sobre a regularidade do ciclo estral, o perfil hormonal e a reserva folicular ovariana de ratas albinas quando adultas. Para isso, dez ratas prenhes receberão uma bomba osmótica contendo 2mg/kg/dia de nicotina a partir do primeiro dia de prenhez, a fim de expor a prole durante toda gestação e amamentação. Outras dez ratas prenhez receberão o implante sem nicotina (grupo controle sham). Duas ratas de cada prole(20/grupo) serão submetidas à eutanásia no 90 dia pós-natal, quando serão coletados sangue eovários. No sangue serão dosados hormônios (GnRH, FSH, LH, estradiol, progesterona e AMH)para verificação da reserva folicular ovariana. Uma parte dessas ratas (5/grupo) terá os ovárioscoletados e congelados para quantificação de receptores hormonais (GnRH, FSH e LH) e marcadores de proliferação (PCNA) e morte celular (Caspase-3), além de marcadores epigenéticos (Dnmt-1, HDAC-4, e metilação e acetilação de histona), por western-blotting. Outra parte das ratas (5/grupo) terá seus ovários coletados, fixados e processados para contagem de oócitos saudáveis ou não, por meio de marcação imuno-histoquímica com anticorpo específico para oócitos e para morte celular (TUNEL). (AU)