Efeito do transplante mitocondrial no dano celular e renal em modelos de hipóxia in vitro e in vivo

• Processo: 24/16112-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2028
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mirian Aparecida Boim
• Beneficiário: Mirian Aparecida Boim
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Edgar Maquigussa
• Assunto(s): Fibrose Inflamação Mitocôndrias Nefrologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fibrose | HIF-1alfa | hipóxia renal | Inflamação | mitocôndria | Nefrologia

Resumo

A disfunção mitocondrial tem papel relevante na fisiopatologia da lesão renal aguda (LRA) isquêmica por mediar as alterações celulares induzidas pela hipóxia. Mitocôndrias e seus componentes podem ser secretados pelas células e estimular células receptoras, influenciando diversos processos celulares, incluindo os metabólicos e inflamatórios. Entretanto, pouco se sabe sobre o efeito de mitocôndrias isoladas de células em normóxia ou hipóxia sobre células e órgãos receptores em um contexto relacionado à hipóxia tecidual. Nossa hipótese é que mitocôndrias provenientes de células em cultura, em condições de normóxia ou hipóxia, podem influenciar a função de células receptoras isoladas ou mesmo do rim isquêmico. O objetivo deste estudo é avaliar o impacto do transplante de mitocôndrias exógenas sobre a função de células tubulares e função renal em modelos in vitro e in vivo de hipóxia. No modelo in vitro, células epiteliais tubulares proximais (mm55K) serão cultivadas em condições de normóxia e hipóxia (94% de N2, 5% de CO2 e 1% de O2) por 48 horas. As mitocôndrias isoladas desses 2 grupos de células serão quantificadas por citometria de fluxo. Posteriormente, células mm55K em condições de normóxia ou hipóxia serão expostas às mitocôndrias isoladas por 24 horas. O efeito da incorporação de mitocôndrias exógenas será avaliado sobre a expressão gênica e proteica de marcadores de viabilidade celular, de matriz extracelular, inflamação, estresse oxidativo, apoptose e metabolismo oxidativo. No modelo in vivo, a LRA será induzida por isquemia bilateral por 45 minutos seguida de reperfusão (I/R) por 7 dias (médio prazo) em camundongos. A administração das mitocôndrias isoladas de células mm55K será feita através de via endovenosa logo após a liberação das artérias renais. O efeito do tratamento mitocondrial também será avaliado a longo prazo, 3 meses após o episódio de isquemia. O efeito do transplante de mitocôndrias será avaliado sobre a velocidade de recuperação da função renal e sobre a estabilidade da função a longo prazo. Os resultados deste estudo poderão abrir possibilidades de estratégia preventiva ou mesmo terapêutica em situações de lesão renal em consequência à isquemia. (AU)