Avaliação da pulpite como causa de inflamação central e alteração de parâmetros sensitivos e comportamentais em modelo pré-clínico

• Processo: 23/10160-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2027
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Jardel Francisco Mazzi Chaves
• Beneficiário: Jardel Francisco Mazzi Chaves
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Ribeirão Preto
• Pesquisadores associados: Christie Ramos Andrade Leite Panissi ; Fabiane Carneiro Lopes Olhê ; Francisco Wanderley Garcia de Paula e Silva ; IGOR BASSI FERREIRA PETEAN ; Manoel Damiao de Sousa Neto
• Assunto(s): Análise molecular Modelos animais Pulpite
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise Molecular | avaliação comportamental | modelos animais | Pulpite | Sensibilização Central | Endodontia

Resumo

A relação do quadro inflamatório pulpar agudo com vias nociceptivas e alterações relacionadas com comportamento e sensibilidade sensorial periférica ainda precisa ser elucidada. Assim, o objetivo deste trabalho é avaliar aspectos inflamatórios em pulpite experimental induzida em camundongos e correlacioná-los com alterações comportamentais, de sensibilidade periférica e consumo alimentar. Para tanto, serão utilizadas metodologias que verifiquem sensibilidade mecânica periférica na pata dos camundongos (teste de von Frey), comportamento do tipo ansioso (teste de campo aberto), consumo alimentar, sensibilidade nociceptiva periférica na pata (teste de formalina), expressão gênica dos genes precursores de moléculas envolvidas no processo inflamatório por meio de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) e avaliação histológica da inflamação do tecido pulpar e avaliação da expressão relativa de marcadores inflamatórios moleculares e celulares a nível central por meio de imunohistoquímica e Western blotting. Esse projeto iniciará após aprovação da Comissão de Ética para Uso de Animais (CEUA). Serão utilizados 192 camundongos WT, C57BL/6J, sendo eles 96 fêmeas e 96 machos. Do total de animais, 144 (72 machos e 72 fêmeas) serão submetidos à pulpite induzida experimentalmente e 48 (24 machos e 24 fêmeas) serão utilizados como grupo controle. A pulpite experimental será realizada após anestesia, por acesso ao tecido pulpar coronário no primeiro molar inferior direito, e inoculação de 10µL de suspensão de LPS (1µg/µL). Durante o desenvolvimento da pulpite, os camundongos (G1 e G2) serão avaliados quanto à sensibilidade mecânica, nociceptiva e análise comportamental em diferentes tempos. Eutanásias estão programadas para três diferentes tempos (dias 02, 05 e 10). Após a eutanásia, serão coletados materiais biológicos de interesse, sendo eles os blocos contendo mandíbula direita e dentes para análise histológica por eosina-hematoxilina, atividade da fosfatase ácida resistente ao tartarato (TRAP) e análise da expressão gênica por qRT-PCR, e o encéfalo também será preservado para análise por imunohistoquímica e para expressão relativa de marcadores inflamatórios por Western Blotting. Os resultados das condições inflamatórias serão correlacionados entre si (local e central) e aos parâmetros comportamentais, de sensibilidade periférica e consumo alimentar. Os dados serão descritos estatisticamente por meio de média e desvio-padrão, bem como verificados para normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk e homoscedasticidade pelo teste de Levene (p>0,05). Conforme a distribuição dos dados, eles serão analisados pelos testes paramétricos ou correspondentes não paramétricos, considerando a correlação entre os dados de expressão gênica e comportamentais, comparação entre os dados de expressão gênica, e a avaliação de medidas repetidas dos dados comportamentais (p < 0,05). (AU)