Competência oocitária e regulação epigenética de complexos cumulus-oócitos após interação com vesículas extracelulares antes e após a maturação in vitro.

• Processo: 25/04898-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2028
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Cláudia Lima Verde Leal
• Beneficiário: Cláudia Lima Verde Leal
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Assunto(s): Bovinos Epigenômica Meiose Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovinos | epigenética | Exosomos | Meiose | Miv | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

Os mecanismos epigenéticos que tornam o oócito competente ao desenvolvimento são questões importantes da biologia do gameta feminino e a melhor compreensão desses fenômenos básicos oferece uma oportunidade para aprimorar biotecnologias com benefícios para humanos e animais. O presente projeto visa utilizar um modelo de estudo de competência oocitária, baseado na indução de bloqueio meiótico temporário e reversível (pré-maturação in vitro, PMIV), para proporcionar tempo adicional de preparação do oócito (OO) e interação das células do complexo cumulus-oócito (CCO) entre entre si e com componentes do nicho folicular antes da maturação in vitro (MIV) final. Assim, propõe-se utilizar a PMIV, e nesse tempo e na MIV, suplementar vesículas extracelulares de fluido folicular (fVEs), constituintes do nicho folicular, para investigar sua contribuição à aquisição de características epigenéticas e moleculares que melhorem a competência oocitária. Na etapa 1 (PMIV/MIV), os OO serão submetidos à PMIV seguida de MIV e, antes e após cada etapa, serão avaliados quanto a: 1) maturação nuclear, 2) padrões epigenéticos (DNA e histonas), 3) expressão de genes imprinted e 4) desenvolvimento embrionário por ativação partenogenética. Na etapa 2, experimento 1, será avaliada a adição de fVEs na PMIV/MIV e efeitos sobre: 1) maturação nuclear e qualidade oocitária (atividade mitocondrial, teor de lipídios, número de cópias de mtDNA, transcritos de metabolismo lipídico e de função mitocondrial e níveis de EROs e GSH) e 2) expressão de genes antioxidantes e de expansão nas células do cumulus (CC). No experimento 2, será determinado o efeito sobre: 1) padrões epigenéticos nos oócitos e 2) transcriptoma (OO e CC). No experimento 3, será avaliada a competência para o desenvolvimento após fertilização e cultivo in vitro e os embriões obtidos quanto a: 1) qualidade (número total de células e apoptose), 2) padrões epigenéticos e 3) expressão de genes de regulação epigenética. Espera-se obter novo conhecimento acerca da regulação epigenética em oócitos e sua relação com fVEs, contribuindo para fornecer bases que ensejem melhorias nas condições de produção in vitro de embriões. (AU)