Correlação entre homeostase de ferro e estresse oxidativo conseqüências para a produção de modificações oxidativas no DNA

• Processo: 95/09442-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 1996
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2001
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Rogerio Meneghini
• Beneficiário: Rogerio Meneghini
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Auxílio(s) vinculado(s): 98/11858-4 - Fe(iii)-atpase: partial purification, AR.EXT; 97/13907-0 - Lucy V. Malinina | Academia de Ciências da Rússia - Rússia, AV.EXT
• Bolsa(s) vinculada(s): 98/09956-8 - Expressao, purificacao e cristalizacao da proteina reguladora de ferro (iron regulatory protein i - irp1)., BP.PD; 97/09509-9 - A ligação do ferro a macromoléculas nucleares e suas consequências para a formação de lesões oxidativas no DNA, BP.PD; 97/04279-5 - Purificação de membrana nuclear de hepatócitos de rato para estudo cinético de transporte de Fe dependente de ATP em vesículas nucleares, BP.IC; + mais bolsas vinculadas 97/02642-5 - Estudo do mecanismo de ativacao da proteina controladora do metabolismo de ferro (irp-1) e de seu envolvimento no ciclo celular., BP.PD; 97/01930-7 - Níveis alterados de H2O2 e O2 em Saccharomyces cerevisiae: perfil de antioxidantes e consequências no DNA, BP.DR; 96/04959-3 - Caracterização da proteína internalizadora de ferro da membrana nuclear, BP.PD - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Transporte de íons Ferro Estresse oxidativo
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Controle Pos Transcricao | Lesoes No Dna | Metabolismo De Ferro | Superoxido Dismutase

Resumo

Íons de ferro têm sido implicados na formação de espécies reativas de oxigênio, as quais podem atacar várias estruturas celulares, e, também, desempenhar um papel fisiológico em vários eventos celulares. Nestes últimos anos temos investigado a produção de lesões oxidativas no DNA, mediadas por íons de ferro. Frente a esse quadro, seria de se esperar que houvesse uma correlação entre homeostase de ferro e estresse oxidativo. De fato, recentemente verificamos que alteração da homeostase de ferro por modificações genéticas da célula resulta num aumento da susceptibilidade do DNA à produção de lesões oxidativas. Descobrimos também um fenômeno inverso: o estresse oxidativo modifica a homeostase celular de ferro. Neste projeto pretendemos prosseguir nestas linhas de investigação com os seguintes objetivos: (1) Entender qual o mecanismo de ativação de IRE-BP (uma proteína citossólica controladora da homeostase celular de ferro) por peróxido de hidrogênio que recém descrevemos. (2) Faremos modificações genéticas em células propícias para ensaios in vitro de transformação celular, procurando alterar a homeostase de ferro. Tentaremos gerar células que internalizam excesso de ferro, e investigaremos então se essas células são mais suscetíveis à transformação que as correspondentes parentais. (3) Prevemos também investigar a estrutura de complexos de íons de ferro com oligonucleotídeos de sequência conhecida, por vários métodos físicos, incluindo cristalografia de raio X. (4) Investigar localização de ferro na cromatina por análise elementar via microscopia eletrônica, baseada na perda diferencial de energia no espalhamento de elétrons. (5) Verificamos recentemente que ferro é captado por núcleos através de um processo ATP-dependente. Pretendemos averiguar se este transporte ATP-dependente é devido a uma ATPase transportadora de Fe inédita. (6)- Deveremos gerar células com alto nível de superóxido dismutase Cu/Zn, por transfecção do gene correspondente. O intuito é verificar a influência do nível do ânion radical superóxido na produção de lesões oxidativas no DNA. (AU)