Analise da expressao diferencial de genes relevantes a proliferacao celular e secrecao de matriz extracelular em fibrobastos de pacientes com esclereose sistemica.

• Processo: 02/01116-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2002
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2005
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Luiz Eduardo Coelho Andrade
• Beneficiário: Luiz Eduardo Coelho Andrade
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Matriz extracelular Escleroderma sistêmico Fibroblastos Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Esclerose Sistemica | Expressao Genica | Fibroblastos | Matriz Extracelular

Resumo

Pretende-se comparar a expressão gênica em fibroblastos de pele comprometida é aparentemente sã na Esclerose Sistêmica (ES). Dez pacientes com ES em fase indurativa com início < 3 anos serão submetidos à biópsia por punch de região comprometida pela ES e de região clinicamente não comprometida. As culturas primárias de fibroblastos derivadas dos fragmentos biopsiados serão usadas e será extraído RNA, que será submetido à transcrição reversa seletiva para mRNA. O respectivo cDNA estará mareado com fluorocromos (Cy3 ou Cy5) e será hibridado a microarrays contendo seqüências de oligonucleotídeos complementares a genes relevantes à proliferação celular, moléculas de adesão, citosinas, matriz extracelular e seqüências expressas (ESTs) não identificadas. A montagem dos microarrays, hibridação e análise do perfil de hibridação (expressão gênica) serão executados automaticamente (sistema GenePix 4000B Arrav Scanner). Achados relevantes dos microarrays serão confirmados por RT-PCR. (AU)