Identificação de proteínas de membrana de Leptospira interrogans serovar Copenhageni através da análise proteômica

• Processo: 04/06371-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2005
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 06/50095-4 - Identificacao de proteinas de membrana de leptospira interrogans sorovar copenhageni atraves da analise proteomica., BP.TT; 05/52498-6 - Identificacao de proteinas de membrana de leptospira interrogans sorovar copenhageni atraves da analise proteomica., BP.TT
• Assunto(s): Espectrometria de massas Leptospira interrogans Proteínas da membrana Vacinas Lipoproteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Espectrometria De Massa | Gel Bidimensional | Leptospira Interrogans | Lipoproteinas | Proteinas De Membrana | Vacinas

Resumo

O projeto propõe identificar proteínas de superfície da Leptospira interrogans empregando análise proteômica. As proteínas extraídas da membrana externa da bactéria serão separadas por eletroforese bidimensional em gel de poliacrialmida, transferidas para membranas de nitrocelulose e sondadas com soro de camundongos imunizados com a bactéria. Proteínas reativas com soro serão digeridas e analisadas por espectrometria de massa. As seqüências peptídicas obtidas serão analisadas em bancos de dados públicos e posteriormente nas seqüências do genoma da L. interrogans serovar Copenhageni (ONSA/FAPESP) (Nascimento et al., 2004a; 2004b). Nesta busca, será dada ênfase às novas lipoproteínas que terão seus genes clonados e as proteínas expressas em E. coli. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal. A atividade imunogênica dos recombinantes será avaliada em ensaios com modelo animal. (AU)