Infeccao experimental de metapneumovirus aviario (subgrupo a e b) e 0 desenvolvimento de tecnicas moleculares para o diagnostico diferencial.

• Processo: 04/14771-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2005
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2007
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Clarice Weis Arns
• Beneficiário: Clarice Weis Arns
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Técnicas de diagnóstico molecular Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) Infecção experimental Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diagnostico Molecular | Infeccao Experimental | Nested-Pcr | Pneumovirus Aviario | Rt-Pcr | Subgrupos A E B

Resumo

Será realizada a infecção experimental dos agentes estudados (Pneumovírus Aviário representantes do subgrupo A, B e "mix" AB) em frangos SPF de 15 dias de idade. Antes da inoculação, todos os animais serão testados quanto sorologia negativa para os agentes estudados. Animais de cada grupo serão eutanasiados em diferentes dias pós-inoculação, processados órgãos para posterior extração do RNA. Em seguida serão aplicadas as técnicas de RT-PCR, nested-PCR para o PVA, anteriormente adaptadas com os vírus isolados. Objetiva-se no presente projeto o desenvolvimento de técnicas moleculares diferenciais para o diagnóstico do Pneumovírus Aviário (PVA) entre os subgrupos A e B, agente etiológico da Rinotraqueíte dos Perus e associado com a Síndrome da Cabeça Inchada (SCI) em galinhas. Amostras de referência dos diferentes subgrupos A e B de PVA serão cultivados em células CER (Chicken Embryo Related). Serão padronizadas as técnicas de extração do RNA viral, RT-PCR e nested-PCR a partir dos vírus cultivados, para serem testadas posteriormente em material coletado de aves infectadas experimentalmente. Para isso serão analisados iniciadores obtidos da literatura, com o intuito de se obter iniciadores externos (para o RT-PCR) específicos para a proteína G do PVA, e iniciadores internos (para o nested-PCR) específicos para os subgrupos do PVA. (AU)