Padronização e aplicação de ensaio imunoenzimático (ELISA) para avaliação da resposta imune humoral em bezerros infectados experimentalmente com Salmonella dublin

• Processo: 08/55765-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
• Pesquisador responsável: José Jurandir Fagliari
• Beneficiário: José Jurandir Fagliari
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Bezerros Formação de anticorpos Técnicas imunoenzimáticas Ensaio de imunoadsorção enzimática ELISA em animal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bezerro | Elisa | Perfil Bioquimico Sanguineo | Resposta Imune | Salmonella Dublin

Resumo

O objetivo do estudo é desenvolver e padronizar um ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto, com o emprego de proteína solúvel (sonicado) como antígeno, para avaliar a resposta sorológica contra Salmonella Dublin em bezerros infectados experimentalmente, bem como determinar a relação entre a resposta imune humoral dos bezerros infectados com a gravidade da infecção e avaliar o efeito do tratamento dos animais com florfenicol associado ou não à fluidoterapia na resposta imune humoral contra S. Dublin. Serão utilizados 24 bezerros sadios da raça Holandesa, com 10 a 15 dias de idade. Uma amostra de sangue será colhida na admissão de cada bezerro, para verificar o teor de anticorpos colostrais por meio do teste de imunodifusão radial. O inóculo para a indução da infecção experimental (desafio) será preparado a partir de uma amostra de S. Dublin (registro IOC 3101/03), fornecida pela Fundação Oswaldo Cruz, Manguinhos-RJ. Os bezerros serão distribuídos aleatoriamente em 4 grupos (G) de seis bezerros, submetidos aos seguintes tratamentos: G1: 10 mL de caldo BHI (controle), PO; G2: 10 mL do inóculo contendo 108 UFC de S. Dublin, PO; G3: 10 mL do inóculo contendo 108 UFC de S. Dublin e tratamento intramuscular com 20 mg de florfenicol/kg de peso ao inicio dos sinais clínicos da infecção, em 2 doses, com intervalo de 48h; G4: 10 mL do inóculo contendo de 108 UFC de S. Dublin e tratamento intramuscular com 20 mg de florfenicol/kg de peso ao início dos sinais clínicos da infecção, em 2 doses, com intervalo de 48h, associado à fluidoterapia IV com solução de Ringer-lactato, na dose de 60 mL/kg de peso/dia.Os bezerros serão submetidos ao exame físico e à coleta de sangue antes da inoculação e a cada 24h, durante sete dias após a infecção experimental. Os resultados do exame físico e das análises laboratoriais serão submetidas a análises estatísticas com auxílio de um programa de computador. (AU)