Avaliacao comparativa da expressao genica em embrioes e fetos bovinos do sexo feminino e masculino reconstituidos por diferentes protocolos de transferencia nuclear.

• Processo: 07/55969-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Joaquim Mansano Garcia
• Beneficiário: Joaquim Mansano Garcia
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Clonagem Inativação do cromossomo X Demecolcina Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Demecolcina | Enucleacao Quimica | Expressao Genica | Inativacao Do Cromossomo X | Oocitos Bovinos

Resumo

Embora existam vários relatos de avanços na clonagem nos últimos anos, verifica-se ainda uma baixa eficiência desse procedimento. A enucleação oocitária é um fator chave que determina o sucesso da clonagem de animais, sendo que a enucleação química é um procedimento não-invasiva muito atrativo por causar mínima diminuição do volume citoplasmático e não exigir coloração no núcleo com corantes específicos de DNA e exposição à irradiação UV. Recentemente, tem-se observado variações no desenvolvimento de clones de diferentes sexos, verificando-se maior perda gestacional em clones do sexo feminino. Embora, muitas vezes os embriões reconstituídos com células somáticas não apresentem alterações morfológicas visíveis, tem-se observado um padrão inapropriado de expressão de alguns genes importantes no subseqüente desenvolvimento. Assim, o presente estudo objetiva determinar e comparar os padrões de expressão gênica de embriões e fetos clonados submetidos a diferentes técnicas de enucleação, reconstituídos em altos e baixos níveis de MPF, verificando-se a expressão de genes importantes ao desenvolvimento embrionário e fetal (Hsp 70.1 e Glut-1). Ainda, será investigada a reprogramação nuclear em clones do sexo feminino e masculino, especificamente de genes ligados ao cromossomo X (Xist e G6PD), contribuindo para um melhor entendimento de questões fundamentais no processo de clonagem, relacionadas às baixas taxas de desenvolvimento e sobrevivência embrionária e fetal. (AU)