Criação e caracterização de um modelo transgênico inédito de camundongos com expressão condicional do gene da conexina 43: um novo paradigma no estudo da comunicação intercelular funcional

• Processo: 09/54530-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia
• Pesquisador responsável: Maria Lucia Zaidan Dagli
• Beneficiário: Maria Lucia Zaidan Dagli
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Junções comunicantes Conexinas Conexina 43 Biossíntese de proteínas RNA mensageiro Transgenes Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cardigogenese | Comunicacao Intracelular | Juncoes Do Tipo Gap | Promotor Induzivel | Transgenia

Resumo

As conexinas (Cx) são proteínas que compõem as junções comunicantes do tipo gap, e dentre as diversas isoformas presentes nos tecidos animais, a Cx43 é a mais prevalente e, consequentemente, a mais estudada. A diminuição de sua expressão está relacionada com diversas alterações fisiológicas, entre elas algumas síndromes, malformações genéticas, aumento da proliferação celular e da carcinogênese. Sua importância in vivo foi relatada em camundongos com deleção de um dos alelos de Cx43 (Cx43+/-). No entanto, os animais knockouts completos (Cx43-/-) não são viáveis após o nascimento devido malformação cardíaca, revelando a importância vital dessa proteína no desenvolvimento cardíaco. Devido esta inviabilidade técnica e fisiológica, centenas de pesquisas científicas foram realizadas apenas com animais heterozigotos (Cx43+/-) comparando-os com animais wild-type (Cx43+/+). Assim, ainda não foi possível estabelecer a real participação da Cx43 nos diferentes processos patológicos, uma vez que o modelo atual não permite a deleção completa da conexina 43 nos diferentes tecidos. Neste contexto, este trabalho propõe a criação de um novo modelo para o estudo da comunicação intercelular funcional, por meio da produção de camundongos geneticamente modificados, viabilizando os animais adultos Cx43-/-. Para isso, um transgene do gene da Cx43 induzível portetraciclina ou análogo será adicionado ao genoma dos animais, assim, a expressão da Cx43 será controlada conforme o desenho experimental de cada estudo científico futuro. Após a criação deste nova ferramenta, será realizada sua caracterização através do estudo morfo-funcional desses animais, além de estudos moleculares como da transcrição do mRNA e tradução da proteína Cx43, sempre objetivando a validação do modelo. De maneira geral, a produção deste novo modelo animal é extremamente importante para a melhor compreensão do envolvimento da comunicação intercelular, mediada pela Cx43, nos diferentes processos patológicos e fisiológicos estudados por diversos grupos de pesquisa nacionais e internacionais. (AU)