Transporte de íons em células renais e sua regulação

• Processo: 09/50467-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Gerhard Malnic
• Beneficiário: Gerhard Malnic
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Canais iônicos Transporte de íons Rim Túbulos renais Células epiteliais Potássio Sódio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Funcao Renal | Ph Celular | Potassio | Sodio | Tubulos Distais | Tubulos Proximais

Resumo

Os projetos desta proposta têm em comum o estudo de transportadores e canais iônicos de membrana. Todos os projetos, a exceção de um, no qual são focados osteoclastos, tratam de células epiteliais renais. Estes projetos são dirigidos principalmente ao estudo de transportadores de H+ e K+, sejam os permutadores Na+/H+ (NHE1, NHE3) seja a H+-ATPase tipo vacuolar, bem como canais de potássio, particularmente ROMKe Maxi-K. Estes transportadores e canais serão estudados tanto em células dos diferentes segmentos de túbulos proximais, como em nefro distai, túbulo contorneado distai, segmento de conexão e duetos coletores. A interação entre a H+-ATPase e canais para CI- tipo CFTR e CLC5 será avaliada utilizando siRNA para silenciar a expressão desses canais em células de túbulos proximais. A interação entre o permutador Na+/H+ e o cotransportador Na+-Glicose será estudada em túbulos proximais de ratos normais e ratos diabéticos. Serão avaliados os efeitos crônicos da angiotensina II sobre a atividade, expressão e localização de NHEs e H+-ATPase, incluindo esclarecimento das vias de sinalização envolvidas nesses processos em diferentes tipos celulares. Além de angiotensina II, serão objeto de análise os efeitos da aldosterona, glicorcorticóides e peptídeo atrial natriurético. O papel das urogualinilinas, angiotensina II e prostaglandina E2 sobre a secreção de H+ e K+ em túbulos renais serão avaliados utilizando técnica de microperfusão tubular. Métodos de investigação empregados nos projetos apresentados: Medidas de concentração de prótons e potássio em fluido tubular utilizando eletrodos com resinas seletivas, em animais "in vivo", por técnica de micropunção de túbulos renais; medidas de concentração intracelular de protons e cálcio com a utilização de sondas fluorescentes em túbulos renais isolados e em linhagens de células imortalizadas em cultura, em microscópio de fluorescência e/ou confocal. Métodos de biologia molecular para expressão e análise de proteínas, silenciamento gênico com siRNA, Northern-, Southern- e Western-blots, imuno-blots, biotinilação de proteínas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CRAJOINAS, RENATO O.; ORICCHIO, FELIPE T.; PESSOA, THAISSA D.; PACHECO, BRUNA P. M.; LESSA, LUCILIA M. A.; MALNIC, GERHARD; GIRARDI, ADRIANA C. C.. Mechanisms mediating the diuretic and natriuretic actions of the incretin hormone glucagon-like peptide-1. AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-RENAL PHYSIOLOGY, v. 301, n. 2, p. F355-F363, AUG 2011. (07/52945-8, 09/50467-7)