Análise funcional e estrutural de proteases e lipases microbianas e vegetais com uso potencial em processos biotecnológicos ou industriais

• Processo: 08/09613-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez
• Beneficiário: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Hidrolases Lipase Peptídeo hidrolases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: lipases | Proteases | Hidrolases

Resumo

O presente projeto pretende dar continuidade a vários sub-projetos que envolvem a linha de pesquisa em prospecção de enzimas hidrolíticas de origem vegetal e microbiana. O objetivo que norteia as pesquisas é isolarmos e caracterizarmos hidrolases com propriedades funcionais interessantes e que potencialmente possam ser incorporadas em processos biotecnológicos ou industriais. Sempre que possível, quando a enzima apresenta propriedades interessantes, procuramos ir além da fase de prospecção e caracterização básica. Na medida em que orientamos no Programa de Pós-graduação em Biofísica Molecular, procuramos também efetuar uma caracterização mais aprofundada da enzima em termos de suas propriedades estruturais e funcionais.A capacidade instalada no Laboratório de Proteínas do IBILCE-UNESP graças a diversos auxílios FAPESP e FUNDUNESP, nos permitiu montar uma infra-estrutura básica destinada ao isolamento e caracterização de proteínas, e no caso específico de enzimas, até 2007 trabalhávamos apenas com aquelas de origem vegetal. Atualmente mantemos colaboração com o grupo de Bioquímica e Microbiologia Aplicada da Profa. Dra. Eleni Gomes e do Prof. Dr. Roberto da Silva localizado neste Instituto, o que nos permitiu expandir as fontes de enzimas para incluirmos também as de microorganismos. Os recursos financeiros pleiteados vão permitir a compra de material de consumo e alguns equipamentos que permitiriam remover alguns obstáculos que impedem uma melhoria na produtividade. No que se refere aos procedimentos de obtenção de enzimas microbianas, em especial de fungos termofílicos, precisamos de um agitador (shaker) com controle de temperatura, pois dois projetos de pós-graduação em andamento têm dificuldades para a utilização desse equipamento no Laboratório de Microbiologia e Bioquímica Aplicada antes citado, devido à elevada demanda.Em relação aos procedimentos de purificação de enzimas, solicitamos um FPLC e um sistema de eletroforese preparativa. Os procedimentos atuais em uso no laboratório para a purificação de proteínas em escala preparativa são bastante defasados no que se refere às etapas de "polimento" da purificação, e os equipamentos solicitados seriam de grande valia para elevar a produtividade.Os demais equipamentos solicitados pretendem substituir sistemas antigos que não funcionam a contento, ou que somos obrigados a pedir emprestado em outros laboratórios nos obrigando a aguardar, em várias oportunidades, que estejam disponíveis. (AU)