| Processo: | 07/59225-0 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de julho de 2008 |
| Data de Término da vigência: | 30 de junho de 2010 |
| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia |
| Pesquisador responsável: | Alfredo Gragnani Filho |
| Beneficiário: | Alfredo Gragnani Filho |
| Instituição Sede: | Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Telomerase Zidovudina Telômero Proliferação Melanoma |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Atividade | Azt | Melanoma | Proliferacao | Telomerase | Telomeros |
Resumo
O melanoma é a principal doença fatal originada na pele. Relatos de várias partes do mundo vêm demonstrando aumento em suas taxas de incidência e mortalidade, devido a isso, há a necessidade de novas pesquisas que busquem co-adjuvantes para o tratamento desta neoplasia, um dos caminhos promissores seria a utilização de drogas como o azidotimidina-trifosfato (AZT), foi provado que o uso dessa droga inibe, in vitro, a ação da telomerase (uma enzima ativa em mais de 90% dos tumores) com importante redução dos terminais teloméricos em alguns tipos de linhagens de células imortalizadas, faz-se necessário um estudo científico e comprobatório do efeito do AZT na atividade da telomerase em culturas de melanoma, tanto primárias como imortalizadas, visto que a inibição da telomerase levaria a célula neoplásica a uma reentrada no ciclo celular normal, conseqüência da redução das seqüências de nucleotídeos repetidas, que por sua vez, a levaria a constantes erosões teloméricas com evolução para morte celular. Utilizaremos linhagem de melanoma imortalizada denominada Hs 839.T e culturas primarias, adquiridas em centro cirúrgico ( com o consentimento de pacientes do Hosp. SP), que posteriormente serão realizadas subcultivos em melo para ambas linhagens, RPMI1640 ( primária) e eagle modificado por Dulbecco (DMEM) ( imortalizadas) mais suplementos, as células devem ser incubadas a 37°C a 5% CO2 , que receberão concentrações variadas em pM de AZT( 0µM, 50µM, 100µM, 200µM, ) para medir a atividade da telomerase através do ensaio TRAP Trapeze XL , o método consiste em um protocolo baseado em PCR com o auxilio de fluorescência para medidas rápidas e sensíveis da atividade da telomerase em extratos de células. O projeto principal de pedido de auxilio refere-se a células imortalizadas e o projeto para bolsa técnica é com células primárias. (AU)
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