Determinação da composição da película adquirida formada sobre esmalte e dentina e da sua modificação após exposição ácida: estudo proteômico

• Processo: 10/15216-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2013
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Aline de Lima Leite
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/03155-0 - Determinação da composição da película adquirida formada sobre esmalte e dentina e da sua modificação após exposição ácida: estudo proteômico, BP.TT
• Assunto(s): Proteoma Cárie dentária Dentina Esmalte dentário Erosão dentária Bioquímica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cárie Dentária | dentina | erosão dentária | esmalte | Película adiquirida | Proteoma | Bioquímica

Resumo

O objetivo deste trabalho será comparar o perfil proteico em películas adquiridas formadas in situ, em diferentes tempos, sobre o esmalte e sobre a dentina humana (subprojeto 1), bem como analisar o perfil proteico nestas películas após a exposição a dois tipos de ácido: lático e cítrico (subprojeto 2). Para cada um dos 2 subprojetos, serão utilizados 54 blocos de esmalte e 54 blocos de dentina humana (3X3 mm). Os experimentos serão realizados em dois dias consecutivos para o primeiro subprojeto e em quatro dias consecutivos, para o segundo. Em cada dia, os voluntários (n=9) utilizarão um dispositivo mandibular contendo 6 blocos de esmalte e 6 de dentina bovina. Para o subprojeto 1, após permanecer com o dispositivo na cavidade bucal por 10 ou 120 minutos para formação de película adquirida, os blocos serão removidos e a película adquirida será removida com um papel de filtro umedecido em ácido cítrico a 3%. Já para o subprojeto 2, após permanecer com o dispositivo na cavidade bucal por 10 ou 120 minutos para formação de película adquirida, os blocos serão imersos em ácido cítrico (1%, pH 2,5) por 1 min ou ácido lático (0,1 M pH 4,8) ou água deionizada por 30 min sob agitação a 37ºC. Na sequência, a película será removida como descrito para o subprojeto 1. Este procedimento será repetido por mais dois dias adicionais para o subprojeto 2. Será feito um "pool' com os papeis de filtro obtidos dos 9 voluntários, para cada tipo de substrato e tempo de coleta (subprojeto 1) e tipo de substrato, tempo de coleta e tipo de ácido (subprojeto 2). No caso do subprojeto 2, este "pool" compreenderá também as amostras coletadas no segundo e terceiro dias. No segundo dia, para o subprojeto 1 e no quarto dia, para o subprojeto 2, os procedimentos serão repetidos, mas não será feito o "pool' das amostras dos diferentes voluntários, para que seja possível avaliar a variabilidade individual. Após extração das proteínas, as mesmas serão submetidas a fracionamento por cromatografia de troca iônica. As frações coletadas serão concentradas e submetidas à cromatografia liquida de fase reversa interligada a um espectrômetro de massas (LC-ESI-MS/MS). Os dados obtidos de MS/MS serão processados e submetidos conjuntamente ao programa SQUEST (Bioworks Browser 3.2, Thermo-Finnigan, São Jose, CA, USA). As buscas serão feitas utilizando-se os bancos de dados SWISS-PROT e TrEMBL . (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DELECRODE, TAISA RIBAS; SIQUEIRA, WALTER LUIZ; ZAIDAN, FLAVIA CARDOSO; BELLINI, MELINA RODRIGUES; LEITE, ALINE LIMA; XIAO, YISHI; RIOS, DANIELA; MAGALHAES, ANA CAROLINA; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Exposure to acids changes the proteomic of acquired dentine pellicle. Journal of Dentistry, v. 43, n. 5, p. 583-588, MAY 2015. (09/53852-9, 10/15216-0, 12/11083-1, 11/03284-4)

DELECRODE, TAISA RIBAS; SIQUEIRA, WALTER LUIZ; ZAIDAN, FLAVIA CARDOSO; BELLINI, MELINA RODRIGUES; MOFFAA, EDUARDO BUOZI; MARTINS MUSSI, MARIA CAROLINA; XIAO, YIZHI; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Identification of acid-resistant proteins in acquired enamel pellicle. Journal of Dentistry, v. 43, n. 12, p. 1470-1475, DEC 2015. (09/53852-9, 10/15216-0)