Estudo da microbiota dos carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma aureolatum, vetores da febre maculosa brasileira

• Processo: 11/50504-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Marcelo Bahia Labruna
• Beneficiário: Marcelo Bahia Labruna
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Carrapatos Simbiose Análise de sequência de DNA Filogenia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Amblyomma Cajannense | Carrapatos | Medichioria Mitochondrii | Rickettsia Rickettsii | Simbiontes | Wolbachia

Resumo

Este projeto foi iniciado na modalidade Pós-Doc, com bolsa Fapesp para Mariana G. Spolidorio (Processo 2010/50144-0), a partir do segundo semestre de 2010, quando a Dra. Mariana esteve fazendo um treinamento nas técnicas abordadas no presente projeto (especialmente a DGGE) no laboratório do Prof. Dr. Cláudio Bando, na Universidade de Milão, Itália. O treinamento na Itália transcorreu dentro do previsto, estando a pesquisadora apta técnicas previstas no presente projeto. No entanto, após regressar em dezembro de 2010, ao laboratório sob minha supervisão na FMVZ/USP, constatamos que não dispomos na FMVZ/USP de equipamentos básicos para realização das DGGEs. Desta forma, esta presente solicitação de auxílio-pesquisa visa basicamente solicitar material básico para complementação deste projeto de pós-doc, que ainda está no início de seu segundo semestre de atividades. Carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma aureolatum são os principais vetores de Rickettsia rickettsii, agente etiológico da Febre Maculosa Brasileira (FMB). Estudos recentes demonstraram que A. cajennense é parcialmente refratário à infecção por R. rickettsii, ao passo que A. aureolatum é altamente susceptível. Essa refratariedade de A. cajennense levanta a hipótese de que a presença de outras bactérias, endosimbiontes, esteja interferindo no mecanismo de infecção e transmissão de R. rickettsii neste carrapato. O presente projeto objetiva identificar, de forma molecular, possíveis endosimbiontes de A. cajennense e A. aureolatum. Para tal, os carrapatos serão submetidos a técnicas de biologia molecular, focadas na pesquisa dos genes 16S rRNA. A partir daí, serão empregadas as técnicas de clonagem ou DGGE para separar os genes dos diferentes microorganismos. Através da análise dos clones de seqüências de DNA bacteriano (gene 16S rDNA), será determinada a predominância de um ou mais agentes, que possivelmente corresponderão a endosimbiontes específicos para cada espécie de carrapato. Os clones predominantes serão sequenciados e submetidos a análises filogenéticas para determinação de sua posição taxonômica e possíveis funções e propriedades biológicas. (AU)