Identificação de espécies de Candida e Aspergillus ssp em frascos de hemocultura artificialmente inoculados

• Processo: 00/14545-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2003
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Vanda Dolabela de Magalhães
• Beneficiário: Vanda Dolabela de Magalhães
• Instituição Sede: Instituto Israelita de Ensino e Pesquisa Albert Einstein (IIEPAE). Sociedade Beneficente Israelita Brasileira Albert Einstein (SBIBAE). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Microbiologia médica Candida Aspergillus fumigatus Reação em cadeia por polimerase (PCR) Técnicas de amplificação de ácido nucleico Sondas RNA Neutropenia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus | Candida Sp | Diagnostico | Pcr Em Tempo Real

Resumo

Pacientes imunodeprimidos são considerados de alto risco para o desenvolvimento de infecções fúngicas. A detecção precoce de espécies de Candida e de Aspergillus reduziria a mortalidade e morbidade associadas, permitindo o rápido inicio da terapia adequada. Os métodos disponíveis de diagnóstico, entretanto, são lentos e de baixa sensibilidade. Este projeto propõe que se identifiquem cinco espécies de Candida e A. fumigatus pela amplificação de seu material nucléico. A utilização de RNA como alvo, por apresentar maior número de cópias por célula do que os genes respectivos aumentam a sensibilidade dos ensaios. Os primers são dirigidos para regiões conservadas do RNA ribossomal e as sondas reconhecem seqüências espécie-específicas e serão marcadas com fluoróforos (sistema Taqman). A amplificação em tempo real (real-time PCR) é um método rápido e, por ser realizado em tubo fechado, diminui as chances de contaminação cruzada (carry-over) entre as amostras (falsos positivos). O método de detecção proposto não é apenas qualitativo, mas também quantitativo, fornecendo um prognóstico e permitindo o acompanhamento da terapia. (AU)