Extração da ascorbato oxidase por processo descontínuo e contínuo utilizando sistemas de duas fases aquosas

• Processo: 05/58328-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2006
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2008
• Área do conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Processos Industriais de Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Adalberto Pessoa Junior
• Beneficiário: Adalberto Pessoa Junior
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Processos bioquímicos Extração líquido-líquido Sistema de duas fases aquosas Polietilenoglicóis Ascorbato oxidase Abóbora Cucurbita Ácido ascórbico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ascorbato Oxidase | Peg/Citrato | Peg/Policaju | Purificacao | Sistemas De Duas Fases Aquosas

Resumo

Este projeto tem como finalidade obter condições de extrair e purificar a enzima escorbato oxidase de abóbora (Cucurbita maxima) por extração líquido-líquido em sistema de duas fases aquosas (SDFA) por processo descontínuo e contínuo. A enzima ascorbato axidase purificada possui várias aplicações práticas, como na determinação e/ou monitoramento da vitamina C ou ácido ascórbico em sucos de frutas, vinhos complexos multivitamínicos, fármacos em geral e em várias análises clínicas. Também pode ser utilizada na agricultura para a determinação do teor de ácido ascórbico durante o amadurecimento das frutas. A aplicação do SDFA é proposta como alternativa para a extração e purificação da ascorbato oxidase, pois permite a separação e análise de partículas biológicas. Esta técnica é aconselhável para purificação em larga escala pela possibilidade de partição seletiva com altos rendimentos, além de apresentar uma boa relação custo-benefício. Inicialmente, será avaliada a influência de quatro fatores (massa molar e concentração de polietileno glicol (PEG), concentração do tampão citrato e pH) na extração por processo descontínuo da ascorbato oxidase, utilizando SDFA compostos por sistema polímero/sal (PEG/citrato) e polímero/polímero (PEG/POLICAJU). Antes da realização das extrações propriamente ditas, serão realizados ensaios para avaliação da estabilidade da enzima frente às variações de pH, temperatura e concentração de policaju em função do tempo. Após definição das melhores condições de extração em processo descontínuo, serão estudadas extrações em sistemas contínuos utilizando coluna de discos rotatórios perfurados (PRDC). Na extração contínua serão avaliadas as seguintes variáveis: velocidade de rotação dos discos, vazão total de alimentação e velocidade da fase dispersa. (AU)