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Extração da ascorbato oxidase de Cucurbita máxima por processo contínuo em coluna de discos rotativos perfurados utilizando sistemas sistemas de duas fases aquosas

Processo: 04/04964-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2004
Vigência (Término): 31 de maio de 2008
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Ciência e Tecnologia de Alimentos - Engenharia de Alimentos
Pesquisador responsável:Adalberto Pessoa Junior
Beneficiário:Tatiana Souza Porto
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Purificação de proteínas   Processamento downstream   Processos de separação   Moléculas bioativas   Sistema de duas fases aquosas

Resumo

Este projeto de tese tem como finalidade obter condições de extrair e purificar a enzima ascorbato oxidase da abóbora (Cucurbita maxima) por extração líquido-líquido em sistema de duas fases aquosas (SDFA) por processo contínuo, utilizando coluna de discos rotativos perfurados (PRDC). A aplicação do SDFA é proposta como alternativa para a extração e purificação da ascorbato oxidase, pois permite a separação e análise de partículas biológicas. Esta técnica é aconselhável para purificação em larga escala pela possibilidade de partição seletiva com altos rendimentos, além de apresentar uma boa relação custo-benefício. Inicialmente, será avaliada a influência de quatro fatores (massa molar e concentração de Polietileno glicol (PEG), concentração do tampão citrato e pH) na extração por processo descontínuo da ascorbato oxidase, utilizando SDFA compostos por sistema polímero/sal (PEG/citrato) e polímero/polímero (PEG/POLICAJU). Antes da realização das extrações propriamente ditas, serão realizados ensaios para avaliação da estabilidade da enzima frente às variações de pH, temperatura e concentração de policaju em função do tempo. Após definição das melhores condições de extração em processo descontínuo, serão estudadas extrações em sistemas contínuos utilizando coluna de discos rotatórios perfurados (PRDC). Na extração contínua serão avaliadas as seguintes variáveis: velocidade de rotação dos discos, vazão total de alimentação e velocidade da fase dispersa. (AU)