Padronização de procedimento histológico para detecção de substâncias tóxicas por meio de imunohistoquímica em larvas de dípteros de importância forense

• Processo: 13/03237-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Parasitologia - Entomologia e Malacologia de Parasitos e Vetores
• Pesquisador responsável: Arício Xavier Linhares
• Beneficiário: Arício Xavier Linhares
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Entomotoxicologia Entomologia forense Imuno-histoquímica Fixadores Diptera Larva Publicações de divulgação científica Artigo científico
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: análise imunohistoquímica | Ciência forense | entomologia forense | entomotoxicologia | Fixadores | tecnica histológica | Entomologia forense

Resumo

A técnica de imunohistoquímica é uma análise toxicológica alternativa para a detecção de drogas em insetos de importância forense, mas necessita de um processo histológico minucioso. Neste estudo nós testamos diferentes fixadores - paraformaldeído tampão fosfato 4% (PP), fluído de Carnoy (CF), solução de Kahle (KS), etanol em diferentes concentrações e etanol associado ao PP e CF - tempo de fixação e processos histológicos para tecidos larvais de dípteros, a fim de desenvolver um protocolo de preparação de amostras para a aplicação da técnica imunohistoquímica. A fixação mais adequada foi alcançada usando o PP por 12 e 24 h, o CF por 3h, o etanol 70%/CF por 2h/3h. A pós-fixação usando pressão negativa, duas imersões em xilol por 30 min cada e uma em xilol mais parafina por 45 min aumentaram a preservação dos tecidos. Um teste imunohistoquímico para a detecção de cocaína foi realizado usando anticorpo monoclonal de camundongo benzoilecognina, IgG anti-camundongo com peroxidase conjugada e visualizado pelo método de revelação com 3,3'-diaminobenzidina mostrou que os procedimentos histológicos feitos não comprometeram a antigenicidade. (AU)