Efeito das oncoproteínas virais E6 e E7 do HPV-16 na resposta de células T de pacientes com carcinoma espinocelular de orofaringe

• Processo: 12/16269-6
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
• Pesquisador responsável: Glauco Issamu Miyahara
• Beneficiário: Glauco Issamu Miyahara
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Daniel Galera Bernabé ; Eder Ricardo Biasoli ; Fabio Daumas Nunes ; Sandra Helena Penha de Oliveira
• Assunto(s): Oncologia Neoplasias orofaríngeas Carcinoma de células escamosas Papillomavirus humano 16 Oncoproteínas Linfócitos T
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinoma espinocelular de orofaringe | Hpv-16 | oncoproteínas E6 e E7 | Oncologia

Resumo

O papilomavírus humano (HPV) vem sendo associado ao carcinoma espinocelular (CEC) de orofaringe, como um possível fator etiológico. As oncoproteínas virais E6 e E7 são capazes de inibir a produção de algumas citocinas e iniciar a produção de outras, tornando a resposta celular frente à infecção deficiente. O propósito deste trabalho é avaliar a influência das oncoproteínas virais E6 e E7 do HPV-16 sobre a resposta de linfócitos T (CD4+ e CD8+) de pacientes com CEC de orofaringe. Serão recrutados para o estudo 40 voluntários sendo 20 pacientes com diagnóstico de CEC de orofaringe e 20 indivíduos sem câncer, que serão submetidos à coleta de amostras de tecido e sangue periférico para mapearmos o HPV-16, pela técnica da PCR em tempo real. Linfócitos serão isolados do sangue periférico, cultivados em meio de cultura e estimulados pelos peptídeos E6 (16-40; 61-85; 91-115) e E7 (31-55; 46-70; 76-98) com pureza de 95%, em três concentrações diferentes. Os níveis das citocinas TNF±, IFN³, IL-2, IL-4 e IL-10 serão mensurados por ELISA no plasma dos participantes e no sobrenadante da cultura de linfócitos após 1, 6 e 24 horas do estímulo. Também será investigado por imunoistoquímica o efeito das oncoproteínas virais sobre a proliferação linfocitária em cultura celular, além da tipificação do infiltrado inflamatório associado ao tumor e a expressão de p16 em amostras de tecido. Os dados dos diferentes experimentos serão submetidos à análise de normalidade e posteriormente os resultados serão classificados em paramétricos ou não paramétricos. (AU)