Resumo
E. faecalis é a espécie mais frequentemente detectada em canais radiculares de dentes com insucesso endodôntico. Entretanto, a informação sobre a viabilidade e os fatores de virulência desses isolados é limitada e merece uma maior investigação. O presente estudo tem como objetivo investigar a prevalência, quantidade e viabilidade de E. faecalis no canal radicular; sua inter-relação com o restante da microbiota; e a expressão de determinantes de virulência dessas amostras. Também será estudada a estrutura populacional de E. faecalis e a relação entre linhagens isoladas de infecções endodônticas com as de diferentes nichos, bem como a relação entre as diferentes linhagens e a presença de marcadores de virulência e resistência a antibióticos. A prevalência e quantificação de E. faecalis em casos de insucesso endodôntico será realizada pelo método da cultura e PCR tempo real. A viabilidade do E. faecalis será investigada utilizando RT-PCR (Reverso Trancriptase PCR). A interação de E. faecalis com a comunidade microbiana será avaliada por análise metagenômica, através de clonagem e sequenciamento de 16 rRNA. Os isolados clínicos de E. faecalis serão avaliados, por métodos genotípicos e fenotípicos, quanto à capacidade de adesão a proteínas de matriz extracelular; formação de biofilme; produção de gelatinase e citolisina; indução de inflamação; e resistência a antimicrobianos. A diversidade genética de E. faecalis isoladas de canais com insucesso endodôntico será realizada por PFGE, e o perfil genotípico e fenotípico dessas cepas será comparado ao perfil de cepas isoladas da saliva e de cepas isoladas de infecções sistêmicas. (AU)
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