Resumo
E. faecalis é a espécie mais freqüentemente detectada em canais de dentes com insucesso do tratamento endodôntico; entretanto, seu papel na etiologia desses casos ainda é desconhecido. Na área médica, E. faecalis é considerado um importante patógeno de infecções oportunistas severas e os estudos sobre os determinantes virulentos dessas cepas são comuns. Por outro lado, os fatores de virulência presentes em isolados de canais radiculares são pouco explorados. Além disso, apesar da grande quantidade de estudos sobre a prevalência de E. faecalis em canais de dentes com insucesso endodôntico nos últimos 10 anos, não existem estudos na literatura que forneçam uma visão global, envolvendo a correlação entre outros aspectos importantes para o desenvolvimento da doença, como quantidade, viabilidade e fatores de virulência dessas cepas. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo investigar a quantidade e a viabilidade de E. faecalis presentes no canal radicular e determinar a expressão de determinantes de virulência destas amostras que possam contribuir para o insucesso do tratamento endodôntico. Também será estudada a estrutura populacional de E. faecalis e será investigada a relação entre linhagens isoladas de infecções endodônticas com as de diferentes nichos, bem como a relação entre as diferentes linhagens e a presença de marcadores de virulência e resistência a antibióticos. A investigação de E. faecalis em amostras de canais radiculares de dentes com insucesso endodôntico será realizada através de diferentes metodologias: cultura, PCR em tempo real, RT-PCR (Reverse Trancriptase PCR) e seqüenciamento de 16S rRNA. Serão analisados nos isolados clínicos de E. faecalis, por métodos genotípicos e fenotípicos, fatores relacionados a adesão a proteínas de matriz extracelular, a formação de biofilme, a atividade citolítica, a produção de gelatinase, a indução de inflamação e a resistência a antimicrobianos. A diversidade genética de cepas de E. faecalis isoladas de canais com insucesso endodôntico será realizada por PFGE, e o perfil genotípico e fenotípico dessas cepas será comparado ao perfil de cepas isoladas da saliva e fezes (microbiota normal residente) e de cepas isoladas de infecções sistêmicas (bacteremia, endocardite, infecções do trato genito-urinário).
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