Efeito pró-regenerativo do glicirrizinato dipotássio no músculo estriado esquelético após envenenamento botrópico experimental

• Processo: 13/10163-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Thalita Rocha
• Beneficiário: Thalita Rocha
• Instituição Sede: Universidade São Francisco (USF). Campus Bragança Paulista. Bragança Paulista , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 13/22004-8 - Efeito pró-regenerativo do Glicirrizinato Dipotássio no músculo estriado esquelético após envenenamento botrópico experimental, BP.TT
• Assunto(s): Mordeduras de serpentes Bothrops Venenos de serpentes Citocinas Miogenina Fatores de regulação miogênica Ácido dlicirrízico Glicirrizinato dipotássico Regeneração (fenômenos biológicos)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bothrops | Fatores de regulação miogênica | Inflamação | Mionecrose | regeneração | Biologia Celular e Molecular, Histologia, Toxinologia

Resumo

Os Viperídeos no Brasil são responsáveis pela maioria dos casos de envenenamento por serpente, sendo 87,5% destes eventos atribuídos ao gênero Bothrops ("jararaca", "jararacuçu", "urutu-cruzeiro", "cotiara", "jararaca-do-rabo-branco", "malha-de-sapo", "patrona", "surucucurana", "combóia", "caiçara"). Tais venenos, bem como a maioria de suas frações têm, predominantemente, ação miotóxica. A elevada incidência destes acidentes associada à ineficácia do soro antiofídico em reverter os danos teciduais locais torna-se necessária à busca por terapias alternativas para o tratamento do envenenamento. O Glicirrizinato Dipotássio (GD - C42H60K2016), derivado do Ácido Glicirrízico (AG - C42H62O16), tem sido amplamente utilizado na indústria farmacêutica e cosmética por suas inúmeras funções, entre elas ação antitumoral, anti-histamínica, antibiótica e anti-inflamatória. Durante o processo de mionecrose eventos moleculares, como a expressão de citocinas, são observados e corroboram para as alterações celulares. Sabe-se que o TNFa e o IFNg atuam paralelamente nas fases iniciais do envenenamento (3 horas) e regeneração (3 dias), sendo este processo concluído após 21 dias. Durante a regeneração as células satélites ativadas rapidamente passam a expressar MyoD. Os mioblastos gerados irão se diferenciar e, então, fundir para formar novas miofibras multinucleadas ou fundir com fragmentos finais de miofibras já existentes. A miogenina é crucial para o processo de diferenciação das células miogênicas in vivo e sua ação em ativar a expressão de genes do músculo esquelético ocorre logo após a atividade transcricional de MyoD. Considerando os potenciais efeitos do GD sobre diversos tecidos, o objetivo deste estudo será avaliar, in vivo, a ação protetora do GD sobre a histoarquitetura do músculo gastrocnêmio, e sua possível contribuição na expressão proteica de MyoD, miogenina, IFNg e TNFa, após envenenamento botrópico experimental. Para isso, camundongos serão divididos em 4 grupos: grupo V (com injeção i.m. de 100 µL de veneno de Bothrops jararacussu - 100 µg/mL), grupo GD (com injeção i.m. de 100 µL de GD a 2% - 100 µL, 1,4 mg/g do peso do animal), grupo V+GD (com injeção i.m. do veneno e GD a 2%) e grupo naïve (N). A aplicação do GD para o grupo V+GD ocorrerá uma hora após o procedimento de inoculação do veneno. Os animais serão sacrificados nos tempos de sobrevida de 3 e 24 h, 3, 7 e 21 dias após a injeção, e os músculos dissecados serão utilizados para as metodologias de microscopia eletrônica, imunohistoquímica e western blotting. A realização destas técnicas permitirá a caracterização histológica da regeneração após mionecrose ocasionada pelo veneno, bem como do efeito pró-regenerativo de GD no músculo gastrocnêmio. Os achados de imunohistoquímica e western blotting permitirão a caracterização destas citocinas e de seu envolvimento no processo de regeneração muscular, regulados/ativados pelas proteínas MyoD e miogenina. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROCHA, THALITA; CAVENATTI, THAIS; NASCIMENTO, LAIS; ZIEGLER, JUSSARA; DE OLIVEIRA, THAIS; GRACIA, MARTA; PRIOLLI, DENISE. Glycyrrhizinate Dipotassium (DPG), Myonecrosis Control and Skeletal Muscle Differentiation: A New Adjuvant Therapy for Snake Envenomation. FASEB JOURNAL, v. 31, p. 2-pg., 2017-04-01. (13/10163-4)