Utilização de lisado de plaquetas na expansão de células-tronco mesenquimais da polpa dentária humana para fins terapêuticos: efeitos na metilação do DNA

• Processo: 14/11872-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2015
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2017
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Marcelo Rocha Marques
• Beneficiário: Marcelo Rocha Marques
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Células-tronco mesenquimais Terapia baseada em transplante de células e tecidos Polpa dentária Metilação de DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células derivadas da polpa dentária | células-tronco mesenquimais | Metilação do DNA | terapia celular | Biologia da células da polpa dentária humana

Resumo

Embora atualmente já existam estudos clínicos em humanos que avaliam o potencial do uso de células-tronco mesenquimais (MSCs) em terapia celular, a necessidade de expansão destas células in vitro em condições "artificiais" ainda torna necessária a definição de melhores protocolos para obtê-las em quantidades e qualidades satisfatórias ao uso em terapias celulares. A substituição de soro fetal bovino por lisado de plaquetas humanas vem sendo sugerida como alternativa viável para a expansão de MSCs com este fim, principalmente por eliminar o potencial imunogênico gerado por proteínas bovinas que ficam associadas às células durante a expansão das mesmas. Adicionalmente, o uso do lisado de plaquetas representa uma opção economicamente viável, uma vez que este material pode ser obtido de hemocentros em um momento no qual não são mais úteis para a aplicação em pacientes (destinados a descarte), mas comprovadamente ainda podem ser utilizados de maneira segura na expansão de células-tronco mesenquimais. A metilação do DNA é um dos eventos epigenéticos mais estudados e representa uma importante via de regulação de expressão gênica em eucariotos nos processos de desenvolvimento, nas definições de fenótipos celulares, bem como participa do início e progressão de diversas doenças. Neste sentido, o objetivo principal deste projeto será estudar como é o perfil da metilação do DNA de células-tronco mesenquimais derivadas de polpa dentária humana quando as mesmas são expandidas com o uso de lisado de plaquetas humanas, em substituição ao soro fetal bovino. Adicionalmente ao estudo de metilação, o efeito do lisado de plaquetas também será avaliado em fatores como expressão gênica, atividade de telomerase, cariótipo e sobre o potencial de diferenciação celular. O desenvolvimento da proposta, além de poder trazer mais informações sobre como lisado de plaquetas humanos modula MSCs, poderá dar sequência ao estabelecimento de ferramentas de análises de metilação de DNA e expressão de RNA em larga escala no Depto de Morfologia da FOP - Unicamp, aonde já existe uma linha de pesquisa com estudos de metilação em processos imuno-inflamatórios, e uma outra linha relacionada a biologia computacional vem sendo implementada. (AU)