Análise da eficiência de um sistema de armazenamento de pequenas quantidades de material biológico em cartão associado a um método de diagnóstico e quantificação molecular de última geração

• Processo: 15/01096-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Pesquisa Inovativa em Pequenas Empresas - PIPE
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2017
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Daniel Blasioli Dentillo
• Beneficiário: Daniel Blasioli Dentillo
• Empresa: Dentillo e Gavio Identificação e Quantificação Molecular Ltda. - ME
• Pesquisadores principais: Dante Gavio
• Pesquisadores associados: Benedito Antônio Lopes da Fonseca ; Simone Kashima Haddad
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/10081-6 - Análise da eficiência de um sistema de armazenamento de pequenas quantidades de material biológico em cartão associado a um método de diagnóstico e quantificação molecular de última geração, BP.PIPE; 16/10065-0 - Análise da eficiência de um sistema de armazenamento de pequenas quantidades de material biológico em cartão associado a um método de diagnóstico e quantificação molecular de última geração, BP.PIPE
• Assunto(s): Surtos de doenças Técnicas de diagnóstico molecular Infecções por HTLV-I Infecções por HTLV-II Reação em cadeia da polimerase em tempo real Reação em cadeia por polimerase (PCR) DNA
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Coleta e transporte de material biológico | Diagnóstico Molecular | Dna | Htlv-1 | Identificação e quantificação molecular | PCR digital | 2 | Virologia/Infectologia

Resumo

Recentes surtos epidêmicos demonstram que uma intervenção adequada e eficaz nos cuidados agudos e na fase seguinte de doenças emergentes e reemergentes, dependem da detecção rápida e segura do agente patógeno. Existe crescente demanda por diagnósticos que consigam determinar o agente causador da doença de maneira sensível e específica, e quantificá-lo de forma acurada nos estágios iniciais da infecção. Também é necessário garantir a segurança e facilidade dos protocolos de coleta, armazenamento, transporte e manuseio de amostras biológicas. No presente projeto, pretende-se avaliar a viabilidade de um sistema que integre armazenamento e transporte de amostras biológicas, por meio de cartões, aliados à identificação e quantificação de ácido nucleico, usando PCR digital (dPCR). Inicialmente realizaremos a técnica de PCR digital (dPCR) em amostras de DNA de pacientes soropositivos para HTLV-1 e HTLV-2, já diagnosticados para esses vírus por PCR tempo real (RT-qPCR), técnica padrão-ouro atual. A comparação dos resultados dessas duas técnicas será usada para verificar se ambas se equivalem. Na segunda etapa da pesquisa, coletaremos amostras de sangue de pacientes soropositivos para HTLV-1 e HTLV-2, as quais serão divididas em 2 partes: uma delas será processada para isolamento de DNA, e a outra será aplicada em cartão, o qual será processado para isolamento de DNA. Então, com as amostras de DNA obtidas de ambos os procedimentos serão realizadas RT-qPCR e dPCR, utilizando kits específicos. Nossa expectativa é que a dPCR possa trazer melhores resultados que a RT-qPCR e que os cartões funcionem como um meio de coletar e transportar sangue sem prejuízos para os resultados das técnicas de PCR. Esperamos, assim, desenvolver um sistema ágil que permita oferecer diagnóstico molecular mais eficiente (mais rápido, sensível, preciso e com preço competitivo), desde a coleta até a entrega de resultados, e que possa atender quaisquer localidades do País. O potencial da empresa poderá será expandido posteriormente para a inclusão de diagnósticos genéticos de outros tipos de patógenos e outras doenças não-infecciosas. Uma vez atingindo nossos objetivos, teremos em mãos um sistema mais prático, seguro, democrático, e menos poluente (por não usar tubos) para diagnóstico molecular de qualidade. (AU)