Laranja de Tiazol como alternativa ao uso de anticorpos para detecção de tripla hélice de DNA na hetrocromatina de Rhynchosciara e Drosophila

• Processo: 17/22497-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2017
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Animal
• Pesquisador responsável: Eduardo Gorab
• Beneficiário: Eduardo Gorab
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 17/02588-6 - Aspectos moleculares de regiões cromossômicas terminais de dípteros da famíla Sciaridae, AP.R
• Assunto(s): Cromossomos Citogenética Anticorpos Drosophila Rhynchosciara
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | cromossomos | DNA de Tripla Hélice | Drosophila | Rhynchosciara | to | Citogenética

Resumo

O método corrente para a detecção de DNA de tripla hélice tem sido nas últimas décadas com o uso de anticorpos contra estruturas não canônicas de ácidos nucléicos. Muitos corantes fluorescentes ligam-se diferencialmente a ácidos nucléicos e mostram frequentemente padrões de coloração distintos ao longo dos cromossomos metafásicos, os quais dependem de variáveis que incluem união ao suco maior ou menor, compactação da cromatina, especificidade nucleotídica e densidade do corante. Recentemente, o fluorocromo TO mostrou ligação preferencial a DNA de tripla hélice em géis. Neste trabalho demonstramos que o TO detecta DNA de tripla hélice em cromossomos da glândula salivar de Drosophila e Rhynchosciara na mesma localização observada com o uso de anticorpos. Os resultados permitirão pesquisar DNA de tripla hélice em escala muito mais ampla e reproduzível do que possibilitam os anticorpos, já que um problema frequentemente observado é o da especificidade e sensibilidade de um anticorpo em relação ao outro. (AU)