Potencializacao da transducao de vetor retroviral pelo emprego de crotamina.

• Processo: 05/57635-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2006
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Sang Won Han
• Beneficiário: Vanessa Dionisio Cantagalli
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Terapia genética Crotamina Tetraciclina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crotamina | Terapia Genica | Tetraciclina | Vetor Retroviral

Resumo

Terapia gênica consiste na introdução de genes em células com a finalidade de restabelecer funções perdidas, estabelecer novas funções ou reforçar algumas atividades através da expressão dos genes introduzidos. A transferência gênica eficiente é uma etapa fundamental para que tal tratamento seja realizado satisfatoriamente. Os vetores retro virais ainda são os mais utilizados para terapia gênica humana, devido a sua simplicidade genômica e facilidade de manipulação. Contudo, sua eficácia varia de acordo com o tipo de célula, o que toma importante a utilização de adjuvantes para otimizar o processo de transdução viral. Um possível adjuvante é a crotamina, uma proteína rica em aminoácidos catiônicos, a qual possui características similares àquelas encontradas nos peptídeos célula-penetrantes. Este projeto visa explorar a crotamina para potencializar a infecção retroviral nas células tronco de polpa de dente, que é vista como uma célula tronco mais primitiva que a de medula óssea. Além disso, a regulação da expressão gênica é essencial para um tratamento seguro e eficaz. O sistema de regulação gênica mediado por antibióticos, tais como tetraciclina e seu derivado doxiciclina, é um dos mais estudados e com comprovada eficiência. Entretanto, as seqüências necessárias para tal regulação requerem dois vetores para transferência ou um único vetor de tamanho elevado, o que dificulta a entrega do gene de interesse. Uma solução para tal problema seria a fusão de dois genes no vetor a ser utilizado, desde que a funcionalidade das proteínas expressas por eles não seja alterada. Portanto, o objetivo deste projeto também consiste em analisar a funcionalidade do gene fusionado de tTA ou rtTA (proteínas regulatórias) com o GFP (green fluorescence protein). (AU)